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苦参碱在甘蓝中残留及安全使用评价摘要：试验以田间试验、检测样品的方式，对苦参碱在甘蓝及土壤中的残留消解动态及最终残留量进行了研究。苦参碱在甘蓝中半衰期为3.15-3.82d，在土壤中半衰期为18.2-21.9h，以推荐的剂量和使药次数，苦参碱在甘蓝中的残留量符合安全要求。 关键词：苦参碱；甘蓝；残留；安全使用评价 中图分类号：S635 文献标识码：A 文章编号：1674-0432（2010）-12-0097-2 苦参碱是广谱杀虫剂，具有触杀和胃毒作用。对作物上的黏虫、菜青虫、蚜虫、红蜘蛛有明显的防治效果。目前从苦参根、茎、叶及其花中共分离出27种生物碱，主要为喹嗪啶类生物碱，其中苦参碱、氧化苦参碱、羟基苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱等为含量较多的生物碱。苦参提取物外观为稳定的褐色均相液，无可见的悬浮物和沉淀物。广泛地应用于防治蔬菜、果树、茶叶、烟草等作物害虫并取得良好防效，为指导农民安全合理地使用农药，于2008年、2009年在江苏、湖南、河北三个地方进行了0.3%苦参碱水剂在甘蓝上的残留试验研究[1]。 1 田间试验 1.1 田间试验设计 试验分为5个处理，每个处理3个重复小区,每小区20m2，1个土壤动态小区面积30m2，另设对照区。施药方法为兑水手动喷雾（按常规兑水量750L/hm2）。 1.2 残留消解动态试验 甘蓝动态：在甘蓝生长至成熟个体一半大小时，以6.75g/hm2（制剂用量150g/亩）剂量手动喷雾施药，按施药后2h、1d、3d、5d、7d、14d不同间隔期采集甘蓝样品，在小区内用随机的方式采样，视甘蓝植株大小，每次每小区采集4 -12株(不少于1kg)生长正常的甘蓝样本，去除明显腐败、萎蔫部分的茎叶，装入样品容器。 土壤动态：在土壤动态小区（30m2），以6.75g/hm2（制剂用量150g/亩）剂量手动喷雾施药，按施药后4h、8h、12h、24h、36h、48h、60h、72h在随机的8个以上采样点，用土钻取0-10cm的地表土2kg以上，在不锈钢盆中混合均匀后，分取200g两份，分别装入样品容器。 1.3 最终残留量试验 每个小区20m2，重复三次，在甘蓝生长期以4.5g/hm2（制剂用量100g/亩）及6.75g/hm2（制剂用量150g/亩）分别施药（2-3）次，在末次施药后间隔1d、3d、5d分别采集甘蓝和土壤样品。 1.4对照区 采集甘蓝和甘蓝四周的土壤为对照样品。 2 检测方法 2.1 检测提要 样品中残留的苦参碱经乙腈提取，过滤盐析后，取上清液，经固相萃取柱净化，液质质（LC-MS-MS）测定[2][3]。 2.2 仪器设备 2.2.1 液相色谱仪 Agilent1200； 2.2.2 质谱系统 Agilent6410三重四级杆； 2.2.3 高速离心机 LG-2.4A型； 2.2.4 匀浆机 CAT X120； 2.2.5 电子天平 感量0.01mg；0.01g。 2.3 试剂和溶液 乙腈：HPLC级；甲醇：HPLC级；水：二次蒸馏；醋酸氨：分析纯；甲酸：分析纯；无水硫酸镁：分析纯；氯化钠：分析纯；安捷伦SampliQ QuEChERS分散SPE试剂盒（硫酸镁/PSA/GCB＝150mg/50mg/50mg）；苦参碱标准品（含量≥98%）。 2.4 分析步骤 2.4.1 提取 土壤提取：称取土壤样品20.0g置于250ml具塞三角瓶中，加入40ml乙腈浸泡过夜，振荡器振荡30min。经快速定性滤纸滤入盛有6g氯化钠的具塞比色管中，剧烈振荡，剧烈震荡，静置分层。甘蓝提取：称取甘蓝样品5.0g置于50ml离心管中，加入3g氯化钠、1g无水硫酸镁、10ml乙腈高速匀浆提取1min，5000rpm离心3min，待用。 2.4.2 净化 取上述2ml乙腈层，倒入装有分散SPE填料并配有0.22micro;m滤头的的一次性5ml医用注射器中剧烈振摇、过滤，待测。 2.5 分析测定 2.5.1 色谱条件 液相色谱系统：色谱柱：C18 150mm×2.1mm，3μm)；柱温：40℃；流动相A：10mmol／L醋酸氨水溶液(含0.1%甲酸)；流动相B：甲醇；流速：0.4ml／min；进样体积：5.0 μL。 质谱条件：大气压电喷雾离子源(ESI)，正离子模式；干燥气温度：350℃；干燥气流速：10.0L/min；雾化器压力35psi；毛细管电压：4.0KV。母离子249.2，定性离子对249.2/176.1与249.2/148.1，碰撞电压分别为47v和47v，定量离子对249.4/148.1。 2.5.2 标准曲线 称取苦参