NY/T 572-2002兔出血病血凝和血凝抑制试验方法.pdf

11.220 器1 中华 人 民共 和 国农 业 行 业标 准 NY/T572-2002 兔出血病血凝和血凝抑制试验方法 Haemagglutinationandhaemagglutinationinhibition testsforrabbithaemorrhagicdisease 2002一08一27发布 2002一12一01实施 中华人 民共和 国农业部 发 布 567 NY/e 572-2002 前 言 兔出血病(曾称兔病毒性出血症)，是兔的毁灭性疫病，世界动物卫生组织{WorldOrganizationfor Animalhealth(英),OfficeInternationaldesEpizooties(法),OIE]和我国分别将之列为f3类和二类动 物疫病。 本标准采用了(AE诊《断试验和疫苗标准手册)(2000版)(ManualofStandardsforDiagnostic restsandVaccines)第2.8.3章规定的常规诊断方法(该方法最早系由我国建立)，与该章的规定相比， 本标准特点:根据本国实践经验，将其具体化，成为操作程序。 本标准由农业部畜牧兽医局提出。 本标准由个国动物检疫标准化技术委员会归no 本标准起q.单位 :江苏省农业科学院畜牧兽医研究所 本标准主要起草人:王启明、董亚芳。 NY/T2 5 7 -2002 兔出血病血凝和血凝抑制试验方法 1 范围 本标准规定了兔出血病血凝和血凝抑制试验的技术要求。 本标准适用于兔出血病的诊断和流行病学调查。 2 血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI) 2.1 材料和试荆 0 0 0 2.1.1 可疑兔及正常兔肝悬液的制备:分别将肝脏剪碎、按 1:1。加入牛理盐水后匀浆 再以4 r/min 离心30min，取上清液做血凝试验 2.1.2 生理盐水 2.1.3 阿氏液(Alsever}s) 成分: 葡萄糖(化学纯) 20K 氯化钠 门.12K 柠檬酸钠(Na,C,H,;O,·2H())(化学纯) 比8! 柠檬酸(H ’〔H;(),·H())(化学纯) )(.055k A馏水 100ml 制法:将以1_药品混合加热溶解、过滤.65.94kPa15min火菌，4交保存备用 2.1.4 1%人 ()‘NY91*细胞悬液的制备:取新鲜人(‘)}I红细胞于阿氏液中保存(置4Y可保存一周)。 用时取人)，(‘”酬红细胞以2。倍量生理盐水混匀洗涤红细胞，2000r/ntin离心 15min，弃仁清，重复洗 涤4次.最后一次离心前，计算红细胞悬液体积(在离心后扣减弃去L清液的体积.即为红细胞的体积)。 洗涤后的红细胞用生理盐水配成 1%悬液，置4(备用。 2.1.5 阳性血清。 2.2 微f血凝试验 2.2.1在96孔VI1微量滴定板上，从第2孔至第11孔，每孔加人生理盐水0(.025ml。 2.2.2 然后在第1,2孔加人1:10的可疑兔肝悬液。025ml. 2.2.3 从第2孔开始，充分混合后用 。.025ml移液管作等量倍比稀样至第 10孔，最后 1孔弃去 0.025ml。 2.2.4 第 11孔是生理盐水对