甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取及双向电泳体系的优化.pdf

第 卷 第 期 华 中 农 业 大 学 学 报 30 2 Vol.30 No.2 年 月 , 2011 4 JournalofHuazhon A riculturalUniversit A r.2011219~224 g g y p 甘蓝型油菜根系可溶性蛋白的提取 及双向电泳体系的优化 王振华 王志方 陈水森 徐芳森 石 磊 / , 华中农业大学作物遗传改良国家重点试验室 微量元素研究中心 武汉 430070 , / 、 摘要 以甘蓝型油菜品种青油 号幼苗期根系为材料 采用三氯乙酸 丙酮沉淀法 酚提法及酚提取 甲 10 - / 。 , 醇 醋酸铵沉淀法分别提取甘蓝型油菜根系可溶性蛋白 以牛血清蛋白为标样 使用 Bradford法测定蛋白质浓 , , ( ) ( ) , 度 计算蛋白提取率 并对所提取的蛋白样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳 SDS及双向电泳 2-DE检测 所 , 、 、 。 , 得 2-DE凝胶图片经 PDQuest软件分析 分别检测得到 644645669个蛋白点 对双向电泳条件进行优化 选 , ( ) 、 择改进的酚提法提取蛋白 采用 的 胶条 蛋白上样量 及 的 胶含 17cm H5~8 IPG 150 10% SDS p μg , 、 。 量 可以获得分辨率高 重现性高的2-DE凝胶图片 ; ; ; 关键词 甘蓝型油菜 根系 蛋白质提取 双向电泳 中图分类号 ; 文献标识码 文章编号 ( ) Q945.12 S511 A 1000-2421201102-0219-06 , 油菜作为一种双子叶植物 需要较多的硼以维 根系是植物矿质营养吸收最直接和最重要的器 [] 8 , 。 , 持其正常生长 但我国的油菜主产地是缺