苦瓜籽蛋白的分离纯化及免疫原性分析 - 四川动物.pdf

四川动物 年 第 卷 第 期 苦瓜籽蛋白的分离纯化及免疫原性分析 杨梅强 聂宇 姚兴川 王殊睿 刘敏 赵欣平 孟延发 四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室动物疾病预防与食品安全四川省重点实验室成都 摘要 经过溶液匀浆抽提硫酸铵分级分离层析 层析 层析从苦瓜籽中同时分离纯化出大量的 苦瓜素和苦瓜抗蛋白 经鉴定二者均为单一条 带表观分子量为 用两种蛋白分别免疫小鼠双向免疫扩散表明两种苦瓜籽蛋白无交叉反应 本 实验为进一步探索修饰 免疫原性变化打下了基础 关键词 苦瓜素 苦瓜抗蛋白 分离纯化 双向免疫扩散 中图分类号 文献标识码 文章编号 苦瓜核糖体失活蛋白均属于 型核糖体失活蛋 川 苦瓜籽购自湖南省蓝山县蔬菜 白即以单链活性形式存在 主要包括 苦瓜素 研究所 的修饰产物由本实验室提供 苦瓜素 苦瓜抗 蛋白 层析介质 购自 种 具有良好的抗肿瘤活性其 公司 层析介质购 自 修饰产物免疫原性下降并且保留了平均 公司 电泳仪 的活性 因具有抗 紫外分光光度计公司 紫外检测仪 活性而得名首次被 等 从苦 型上海嘉鹏科技有限公司 超滤 瓜种子和果实中分离纯化得到 不仅具有 浓缩膜包公司 糖苷酶活性还可以切割质粒和的 方法 本文改进了前人的方法 粗提液制备称取 去壳苦瓜子粉碎 在纯化 的同时纯化出大量的 为 用预冷的 匀浆 滴加 进一步探索修饰后免疫原性变化打下了基础 调至 搅拌 离心匀浆液 除去大量沉淀 材料与方法 继续离心 进一步去沉淀 上清用的 材料 硫酸铵沉淀 静置 离心 周雌性小鼠 只体重为 去沉淀 上清用 的硫酸铵沉淀 静置过 购自四川大学实验动物中心生产许可证号 夜 离心 收沉淀 沉淀用 收稿日期 接受日期 作者简介杨梅强男 通讯作者 四川动物 年 第 卷 第 期 预冷的 磷酸钠盐缓冲液 溶 抗原加 然后倒置放入湿盒中 恒温孵