青ж作用后大鼠肝星状细胞蛋白质组双向电泳技术的建立 - 安徽农业科学.pdf

，ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｎｈｕｉＡｇｒｉ．Ｓｃｉ．２０１３，４１（４）：１４３２－１４３４ 　　　  ， ， ， ， 　 （ ， ６４６０００） 　［ ］ ， 。［ ］ ， ， ， 。［ ］ １％ＴＢＰ、４％ ＣＨＡＰＳ、０．２％Ｂｉｏ－Ｌｙｔｅ、４０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ、８ｍｏｌ／Ｌ 、２ｍｏｌ／Ｌ ； ｐＨ４～７ ＩＰＧ ， ， Ｂｉｏ－Ｒａｄ ； ， 。［ ］ ， ， 、 、 。 　 ； ； ； ； 　Ｓ１８８　　　Ａ　　　０５１７－６６１１（２０１３）０４－０１４３２－０３ ＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆＴｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓＳｙｓｔｅｍｆｏｒＰｒｏｔｅｏｍｅｓｆｒｏｍＲｂｌＴｒｅａｔｅｄＨｅｐａｔｉｃＳｔｅｌｌａｔｅＣｅｌｌｏｆＲａｔｓ ＺＨＡＮＧＣｈｕｎｙａｎｅｔａｌ　（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，ＬｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅ，Ｌｕｚｈｏｕ，Ｓｉｃｈｕａｎ６４６０００） Ａｂｓｔｒａｃｔ　［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］Ｔｈｅｓｔｕｄｙａｉｍｅｄｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｓｙｓｔｅｍｏｆｔｗｏｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ（２ＤＥ）ｆｏｒｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｐｒｏｔｅｏｍｅｓｆｒｏｍ ｒａｔＨＳＣＴ６ｃｅｌｌｓ，ｉｍｐｒｏｖｅｉｔｓｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎａｎｄｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｉｔｙ．［Ｍｅｔｈｏｄ］ＡｆｔｅｒｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｄＨＳＣＴ６ｃｅｌｌｓｗｅｒｅｔｒｅａｔｅｄｂｙＣｈｉｎｅｓｅｗｈｉｔｅｏｌｉｖｅ， ｔｈｅｐｒｏｔｅｉｎｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄ，ａｎｄｓｅｐａｒａｔｅｄｂｙ２ＤＥｉｎｓｔａｎｄａｒｄｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｉｔｈａｎｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｆｏｒｅａｃｈｉｍｐｏｒｔａｎｔｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｐａｒａｍｅｔｅｒ． ［Ｒｅｓｕｌｔ］Ｔｈｅｌｙｓｉｓｂｕｆｆｅｒｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ１％ＴＢＰ，４％ＣＨＡＰＳ，０．２％ＢｉｏＬｙｔｅ，４０ｍｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ，８ｍｏｌ／Ｌｕｒｅａ，２ｍｏｌ／Ｌｔｈｉｏｕｒｅａｗａｓａｐｐｌｉｅｄｔｏ ｅｘｔｒａｃｔｐｒｏｔｅｉｎｓｆｒｏｍｃｅｌｌｓ．Ｔｈｅｐａｓｓｉｖｅｒｅｈｙｄｒａｔｉｏｎｓｃｈｅｍｅｏｆｓａｍｐｌｅｓｗａｓｕｓｅｄｔｏｈｅｌｐｔｈｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｌａｒｇｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｗｅｉｇｈｔｐｒｏｔｅｉｎｓｉｎｔｈｅ ＩＰＧｇｅｌ．ＥｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓｐａｒａｍｅｔｅｒｓｒｅｃｏｍｍｅｎｄｅｄｂｙＢｉｏＲａｄＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｗｅｒｅａｄｊｕｓｔｅｄａｄｅｑｕａｔｅｌｙ．Ｉｎｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｓｉｌｖｅｒｓｔａｉｎｉｎｇ，ａｓｕｆｆｉ ｃｉｅｎｔｗａｓｈｉｎｇｏｐｅｒａｔｉｏｎｅｎｓｕｒｅｄａｗｅｅｋｂａｃｋｇ