奶粉中蛋白质检测设计实验 - 大学化学.pdf

第26卷 第2期 摇 摇 大 学 化 学 Vol.26 No.2 摇 2011年4月 UNIVERSITY CHEMISTRY Apr.2011 摇 奶粉中蛋白质检测设计实验* 李红霞摇 张俊杰摇 赵艳琴 (河北联合大学化学工程学院摇 河北唐山063009) 摇 摇 摘要摇 奶粉中蛋白质检测设计实验提供给学生3~4种测定蛋白质所需的实验条件。 让学生通过查阅资 料对各种蛋白质测定方法进行评述,并根据给出的实验条件,选择一种方法进行实验。 摇 摇 关键词摇 蛋白质摇 奶粉摇 检测摇 设计实验 摇 摇 乳品中蛋白质的含量是一项重要的检测指标,以前常采用凯氏定氮法进行测定,该方法的原理是通 过测定乳品中氮的含量,然后再换算成蛋白质的含量。 但该检测方法无法区分蛋白氮和非蛋白氮。 如 三聚氰胺中的氮含量高达66.67%,远高于蛋白质中氮的含量(16%)。 故有不法分子利用这种检测方 法存在的漏洞,通过在乳品中加入三聚氰胺使蛋白质的含量虚高,从而获得暴利。 据此,我们对分析化 学专业实验课的教学项目及方法进行了调整,将原有的实验课依附于理论课开设改为了完全独立,打破 了各门课程的界限,开设了综合性更强、设计性为主的实验课程。 下面就谈谈开设奶粉中蛋白质含量检 测实验的体会。 1摇 蛋白质检测设计实验的意义 蛋白质含量是很多食品质量评价的一项重要指标,对于肉类、蛋类、乳品类等食品来说,通常根据蛋 白质的含量确定食品的等级,因此,蛋白质含量的检测是食品分析的一个重要的内容。 以前对学生开设 的蛋白质检测实验采用的是凯式定氮法,这个方法虽然简单,但是单一的方法无法让学生了解更多的其 他蛋白质检测方法,也无法比较各种蛋白质检测方法的优缺点。 为此,我们将该实验改为设计性实验。 2摇 蛋白质检测设计实验 蛋白质的含量测定有凯氏定氮法、双缩脲法、Folin鄄酚试剂法、紫外吸收法、考马斯亮蓝法及氨基酸 分析仪法等多种方法。 实验中给出至少3种测定蛋白质的方法,让学生首先查阅相关的文献资料,列出 各种蛋白质分析方法的原理,并对各方法进行简单的评述;根据给出的实验条件选择其中的一种方法进 行实验;写出具体的实验方案,交给实验教师进行审核;教师根据学生的选择情况进行分组,以提问或小 考的方式检验学生对实验的准备情况,确认后进行实验,并给以适当的指导;学生对实验数据进行分析, 撰写实验报告,并对结果进行分析;教师评定学生成绩,并对不同分析方法得到的结果进行总结,反馈给 学生。 2.1摇 实验方案 实验给出的具体条件如下: 主要设备:氨基酸分析仪,电炉,紫外可见分光光度计,凯式定氮仪,高速离心机,超声波清洗器,微 波蛋白质水解仪。 主要玻璃仪器:容量瓶、蒸馏瓶、冷凝管、各种规格的移液管、烧杯、三角瓶、滴定管、蛋白质水解管 等。 * 基金资助:河北理工大学教育教学重点项目(Z0801鄄01) 50 大 学 化 学 第26卷摇 主要药品:硼酸、氢氧化钠、硫酸铜、浓硫酸、甲基红指示剂、酒石酸钾钠、盐酸、氨基酸分析仪用各种 缓冲溶液、茚三酮溶液等。 2~3种奶粉样品,实验教师可以人为地在样品中定量加入少量的三聚氰胺(尿素、硫酸铵等其他铵 盐)。 要求学生查阅有关蛋白质检测的相关文献资料,并对文献进行综述。 在所给出的实验条件基础上, 共有4种蛋白质检测方法可供学生选择,即凯氏定氮法、双缩脲法、紫外吸收法和氨基酸分析仪法。 2~3名学生为一组,选择其中一种方法进行实验。 要求写出具体的实验原理、所需仪器设备、试剂,并写 出详细的实验步骤及结果计算公式。 2.2摇 实验方案的实施 2.2.1摇 凯氏定氮法 + + 摇 摇 该方法是先将样品在硫酸铜存在下,以浓硫酸在加热的条件下使蛋白质分解,释放出NH ,NH 与