鸡致病性e coli o24基因工程包涵体疫苗的制备及 - 河北师范大学学报.pdfVIP

第 34 卷/ 第 1 期/ 河北师范大学学报/ 自然科学版/ Vol . 34 No . 1 20 10 年 1 月 J OURNAL OF HEBEI NORMAL UNIVERSITY/ Natural Science Edition/ J an. 20 10 鸡致病性 E . col i O24 基因工程包涵体疫苗 的制备及免疫原性 1 1 1 1 2 水小溪 , 　李寒鸣 , 　蔡 　乐 , 　赵宝华 , 　张天兵 ( 1. 河北师范大学 生命科学学院 ,河北 石家庄 　0500 16 ; 2 . 华北制药集团 华胜有限公司 ,河北 石家庄 　052 160) 摘 要 :利用已构建的基因工程菌株 BL2 1/ p ET28apilA 和 BL2 1/ p ET28aomp C ,经 IP T G 诱导 , SDSPA GE 分析分别可见表达的20 ku 和 40 . 9 ku 的特异条带 ,确定蛋白以包涵体的形式存在. Western blot 结果表明 ,表达的 ( ) ( ) Ⅰ型菌毛蛋白 pilA 基因编码 和外膜蛋白 omp C 基因编码 可与抗体发生特异性结合 ,说明其具有 良好的反应原 性. 将表达特异蛋白的重组菌株 BL2 1/ p ET28apilA 和 BL2 1/ p ET28aomp C 分别制成基因工程包涵体疫苗 ,免疫 小鼠后 ,具有很好的保护能力. EL ISA 结果显示 ,免疫的小鼠体内已产生相应的抗体 ,效价为 1 ∶400 ,说明这 2 种疫 苗有很好的免疫原性. 表明这 2 株基因工程菌株有望作为鸡致病性大肠杆菌基因工程疫苗的候选生产菌株. 关键词 :pilA ; omp C ; 基因工程包涵体疫苗 ; 免疫原性 中图分类号 :Q 789 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 (20 10) 0 10 10305 ( ) ( ) 鸡大肠杆菌病 chicken colibacillo sis 是由埃希氏大肠杆菌 Escherichia col i 的某些血清型引起的一种常 见细菌性传染病 ,包括肉芽肿 、腹膜炎 、输卵管炎 、脐炎 、滑膜炎 、气囊炎 、眼炎 、卵黄性腹膜炎等疾病[ 1 ] . 近年 来 ,几次鸡大肠杆菌病的大爆发 ,给世界养禽业造成了严重的经济损失. 鸡大肠杆菌病已经引起了世界各国 政府 、研究工作者以及养禽专业户的高度重视. ( Ⅰ型菌毛蛋白由pilA 基因编码 ,是大肠杆菌菌体表面的一种蛋白性突起 ,是鸡致病性大肠杆菌 Avian ) p at hogenic Escherichia col i ,A P EC 致病的重要因素之一 ,对鸡大肠杆菌在鸡体内的定居 、增殖 , 以及协作毒 [2 ] ( ) 素的释放等方面起着重要作用 . 研究发现 , 由鸡大肠杆菌质粒编码的外膜蛋白 omp C 基因编码 在其致病 过程中起重要作用 ,与大肠杆菌外膜的通透性有关 ,是重要的毒力因子 ,位于外膜外侧[3 ] . 目前控制鸡大