龙茭2号不同发育阶段茎部活性氧的检测分析.pdf

DOI：10．3865~．issn．1001—3547．2015．22．032 龙茭2号不同发育阶段茎部活性氧的检测分析 康璐瑶 ，崔海峰，邢阿宝，李帅，叶子弘 (中国计量学院生命科学学院／浙江省生物计量与检验检疫技术重点实验室，杭州，310018) 摘 要 ：基于龙茭 2号茎部不同发育阶段及不 同部位相关保护酶活性变化 ，比较分析 了茭白茎部发育过程 中活性氧 的变化。龙茭2号茎部横切面及纵切面的NBT染色观察发现 ：超氧化物歧化酶 (SOD)主要分布在茭 白茎部维管束周 围，发育早期茎部尖端染色较深。SOD和过氧化物酶 (POD)的活性检测分析发现 ，龙茭2号3个不 同部位 中SOD及 POD的活性变化趋势一致 ，发育早期和后期保护酶活性较高，中期活性较低 。 关键词 ：茭白；活性氧 ；超氧化物歧化酶 ；过氧化物酶 ： 中图分类号：$645．2 文献标识码 ：A 文章编号 ：1001—3547(2015)22—0092—03 茭 白(ZizanialatifoliaTurcz)又名茭瓜 、茭笋 、菰 1 材料与方法 手、雕胡．属于禾本科多年生水生宿根性草本植物 ． 1．1 试验材料 无性繁殖 ，原产于 中国和东南亚lJI，是我国第二大水 供试 品种为双季茭 白龙茭 2号 ，选取 3个不同 生蔬菜 ，具有重要的经济价值。茭白孕茭与茭白黑 时期 (5、10、15cm)的膨大茎部 。试验所需材料在桐 粉菌侵染茭白植株密切相关 ，茭白黑粉菌侵染茭 白 乡董家茭 白基地采集。 成功后 ，茭白的开花受到抑制 ，就会刺激 茭白茎部 1．2 试验方法 膨大 ，形成可食用的膨大茎gl。茭 白黑粉菌是一种寄 采用 NBT组织染色法染色观察 ，选取不 同发 生真菌 ，其侵染茭 白使茭 白茎部膨大形成可食用 肉 育阶段生长 良好 的龙茭 2号茭 白，设定 肉质茎长度 质茎的过程 ，实际上就是一个感病 的过程 。研究发 依次为 5、10、15cm，用刀片分别切取其尖端 、中部 现植物受到病原物侵染 ，会诱导活性氧暴发 ，而大 和基部并制成切片，尽量使切片厚薄均匀。将制作 量活性氧的积累会造成细胞组分 的严重损伤3[1。因 好 的样 品放入盛有 750Ixmol／LNBT溶液 的平皿 此 ．植物在长期的进化过程中形成了一系列的免疫 中，使 NBT溶液没过样品，室温染色 6h后 ．超纯水 防御反应 ，存在多种活性氧清除机制 ，其中酶促保 洗涤 3次后于电子显微镜下观察染色情况。 护机制 ，如超氧化物歧化酶 (SOD)、过氧化物酶 参照宋凤呜等[61的方法测定 SOD活性 ，参照秦 (POD)在活性氧的清除中具有重要作用D,5]。 国政等l7l的方法测定 POD活性 。 本试验对茭 白与黑粉菌互作 中龙茭 2号植株 自身的活性氧激活及相关保护酶的变化进行分析 ， 2 结果与分析 通过对茭 白不 同部位 中2种保护酶 的活性变化分 2．1 NBT组织定位染色结果 析 ，探讨 了茭白孕茭过程中茭 白黑粉菌侵染 引发的