牛结核γ-干扰素elisa 检测试剂盒使用说明书.pdf

牛结核γ-干扰素ELISA 检测试剂盒使用说明书 【用途】 本试剂盒适用于牛结核病的体外快速诊断，通过检测牛血浆培养物中的γ 干扰素 （γ-I FN ），诊断牛是否感染牛结核。 【原理】 本试剂盒基于血液T 淋巴细胞对牛结核分枝杆菌的细胞免疫反应，在PPD 抗原刺激全 血中的淋巴细胞后，未感染牛结核分枝杆菌的淋巴细胞不会产生 γ-IFN ，而感染了牛结核 分枝杆菌的细胞就能产生γ-IFN ，并通过本试剂盒检测到。同时设立禽型提纯结核菌素 （A PPD ）作为对照，排除由禽型结核分枝杆菌引起的反应。 本试剂盒使用抗牛γ-IFN 抗体包被微量反应板，利用夹心ELISA 原理进行检测。如果 待测样品中含有牛γ-IFN ，则与包被抗体结合，加入辣根过氧化物酶标记的抗γ-IFN 抗体（牛 γ-IFN 酶结合物）后，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，再加入TMB 底物液作用显色，在 酶标仪450nm 波长测定各孔吸光度值，通过PBS 刺激样品、BPPD 刺激样品和APPD 刺激 样品OD 值的差值判定结果。 【试剂盒组成】 名 称 数 量 使 用 检测用： 1．牛γ-IFN 抗体包被板 2 块（8×12 孔） 可直接使用 2 ．10 倍浓缩洗涤液 1 瓶（120mL ） 可直接使用 3 ．牛γ-IFN 阴性对照 1 支（2.0mL ） 可直接使用 4 ．牛γ-IFN 阳性对照 1 支（2.0mL ） 可直接使用 5 ．牛γ-IFN 酶结合物 1 瓶（24mL ） 可直接使用 6 ． 底物液A 1 瓶（15mL ） 可直接使用 7 ． 底物液B 1 瓶（15mL ） 可直接使用 8． 终止液 1 瓶（15mL ） 可直接使用 9 ．一次性封板膜 4 张 10 ．自封袋(干燥剂) 1 个 11．说明书 1 份 培养用刺激原： 12．无菌PBS 1 支（7mL ） 无菌环境直接使用 13．牛型提纯结核菌素（BPPD ） 1 支（7mL ） 无菌环境直接使用 14．禽型提纯结核菌素（APPD ） 1 支 （7mL ） 无菌环境直接使用 【试剂盒所需辅助材料】 名 称 数 量 使 用 采血： 1．一次性采血针 100 个 每头动物1 支 2 ．肝素锂真空管 100 支 每头动物1 支 3 ．无菌24 孔培养板 13 个 无菌环境直接使用 备注：如需购买此辅助材料，请于订购单中注明。 【其它需自备的物品】 1．50uL 和100uL 的精确微量移液器，200uL 八或十二通道微量移液器； 2 ．一次性移液器吸头； 3 ．稀释用96 孔板； 4 ．37℃避光孵育箱； 5 ．1000mL 量筒（配制洗涤液用）； 6 ．酶标仪（含450nm 波长滤光片）； 7 ．蒸馏水或去离子水； 8