鹰嘴豆分离蛋白分离纯化.pdf

158 2008, Vol. 29, No. 03 食品科学 ※基础研究 张 涛，江 波，沐万孟，李艳红 (江南大学 食品科学与安全教育部重点实验室，江苏 无锡 214122) ：以Native或RP-HPLC为纯度检测手段，运用Sephacryl S-200和DEAE-Sepharose CL-6B对CPI进行 分离纯化，得到分子量为170kD(标记为B)和110kD标记为(D)的两个主要组分，这两个主要组分分别占蛋白质总量 的60.4% 和17.7%。 ：鹰嘴豆；蛋白质；分离纯化 Purification of Chickpea Protein Isolates ZHANG Tao，JIANG Bo，MU Wan-meng，LI Yan-hong (Key Laboratory of Food Science and Safety, Ministry of Education, Jiangnan University, Wuxi 214122, China) Abstract ：Chickpea protein isolates (CPI) were separated and purified with Sephacryl S-200 and DEAE-Sepharose CL-6B successively, and two major fractions were obtained, accounting for 60.4% and 17.7% of the total proteins, which molecular weights were 170 kD(signed as B)and 110 kD(signed as D), respectively. Key words：chickpea；protein；purification 中图分类号：TS201 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2008)03-0158-04 蛋白质的功能性质不仅与其来源、加工方法等有 Sigma 公司；其他所用试剂均为分析纯。 关，而且与蛋白质的物理化学性质、结构特征等密切 1.2 仪器与设备 相关，包括蛋白质的大小、形状、氨基酸组成及序列、 层析柱(φ1.6cm×150cm，φ2.6cm×20cm) 上 带电情况及其分布、疏水/ 亲水比例、二级结构(α- 螺 海锦华层析设备厂；HL-2 恒流泵、BS-100A 型自动部 旋、β- 折叠、转角、无规卷曲)及其含量分布、三级 份收集器 上海市沪西仪器厂；HD-93-1型紫外检测仪 及四级结构、分子内或分子间交联以及蛋白质在溶液环 上海金达生化仪器厂；垂直板电泳槽(仪) Bio-Rad公 境中的分子伸展情况(即分子柔性)等[1]，而蛋白质的分离 司；HPLC色谱仪 Waters公司。 纯化研究对其结构特性研究极为重要。 1.3 方法 鹰嘴豆是世界第二大消费豆类, 产量居世界豆类第 1.3.1 鹰嘴豆分离蛋白质的制备 三[2-6]，是目前世界上栽培面积较广的食用豆类作物之 参照文献[9]制备。 一。作为植物蛋白质的重要来源，对鹰嘴豆分离蛋白 1.3.2 Sephacryl S-200凝胶过滤 的制备方法及其功能性质研究较多[4,7-11]。但有关鹰嘴豆 凝胶Sephacryl S-200在洗脱缓冲液中平衡后脱