红霉素发酵工艺优化研究3.pdf

15 卷 1 期 生 　物 　工 　程 　学 　报 Vol . 15 No . 1 1999 年 1 月 Chinese J ou rnal of B iotechnology J anuary 1999 红霉素发酵工艺优化研究 1 1 1 1 2 范代娣 　陈　斌 　尚龙安 　沈立新 　孙建敏 1 ( 西北大学化工系 　西安 　7 10069) 2 ( 西安制药厂 　西安 　7 10077) 摘 　要 　通过摇瓶正交实验 ,得出 7 种营养成分对红霉素生物合成的影响程度 ,对发酵工艺 条件进行了优化研究 ,找到了红色链霉菌抗噬菌体 68 # 菌种生长的优化组合 ,得出快速碳源 ( ) ( ) 葡萄糖 与慢速碳源 淀粉 配比为 2 64 时 ,有利于红霉素的生物合成 。还原糖/ 氮为 20 ,总 糖/ 氮为 80～120 时对红霉素发酵极为有利 。借助磷酸三钙 、沸石对 N H + 的独特吸附和释 4 放作用 ,将二者按 5 ∶1 混合配成吸附和吐纳效果很好的捕集剂 ,对发酵液中游离无机氮源进 行控制 ,可使抗生素生物合成提高 15 %～29 % 。 关键词 　红霉素 ,发酵工艺参数 ,优化 分类号 　Q 93997 　　文献标识码 　A 　　文章编号 　1000306 1( 1999) 0 10 10408 红霉素属大环内脂类抗生素 ,它的抗菌谱和青霉素 G 相似 ,特别对革兰氏阳性细菌 、 抗酸杆菌 、立克次氏体及大病毒有抗菌活性 ,是治疗耐药性金黄色葡萄球菌感染和溶血性 链球菌感染所引起疾病的首选药物 ,临床上可用于对青霉素过敏的患者 。我国红霉素发 酵水平与发达国家相比差距很大 ,属低水平重复操作 ,美国亚培公司年生产红霉素能力为 2000 t ,而我国红霉素年产量仅为 200 t [ 1 ] , 国外发酵单位已达 8000～12000 u/ mL [2 ] ,生产 利润极少 ,但由于红霉素衍生物的不断涌现及人们对红霉素药理作用的重新认识 ,尤其是 在医药行业被誉为“重磅炸弹”的红霉素衍生物 ,克拉霉素 、阿齐霉素的兴起 ,更加剧了母 体红霉素的供需矛盾 。 本研究旨在利用具有抗噬特性的 68 # 菌种作为研究对象对其工艺进行优化研究 。不 仅具有重要理论价值 ,而且具有明显的经济效益 。 1 　材料和方法 11 　菌种 采用西安制药厂 68 # 抗噬菌株 。 12 　种子培养基 培养基组成淀粉 35g ,黄豆饼粉 17g ,玉米浆 09g ,花生饼粉 15g ,葡萄糖 35g 。 蛋白胨 13g ,硫酸铵 06g ,磷酸二氢钾 015g ,酵母粉 05g ,用自来水定容到 100mL 。 ( ) ( ) 本课题为陕西省科委重大攻关项 目 96 K12 - G11 ; 陕西省教委重点项 目 97J ZK09 。 其它工作人员 :张 　莉 ,李宝璋 ,杨隧东 。 收稿 日期 ,修回日期 。 1 期 范代娣等 :红霉素发酵工艺优化研究 105 13 　培养条件 13 1 　斜面孢子培养 : 用无菌操作将孢子悬浮液接于茄子瓶斜面培养基上 ,置 37 ℃恒 温室中培养 6～7d 。 13 2 　一级种子培养 : 培养基灭菌前p H 调至 68 ,32 ℃培养 ,将斜面孢子挖块接种于三 角瓶内置于摇瓶机上振荡 2 d 。 13 3 　二级种子培养 : 培养基灭菌前 p H 调至 68 ,将培养 2d