琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测小麦基因组dna rapd 扩增 .pdf

238 CHINA BIOTECHNOLOGY 2003 8 DNA RAPD * * * 赵 培 王振英 彭永康 ( 300074) 通过20% (wv) 的琼脂糖凝胶和5% (wv) 的聚丙烯酰胺凝胶电泳对小麦白粉病抗感特 性品种基因组DNA 的RAPD 测结果表明: 5%聚丙烯酰胺凝胶对线性DNA 分子( 01~ 20kb) 和 长度相差100bp 以下的DNA 分子的分离较20% 的琼脂糖凝胶电泳效果好因此, 我们研究出 了一项利用聚丙烯酰胺凝胶电泳 测小麦白粉病抗感特性的新技术, 在工作中建立了一种适合 于 测小麦基因组DNA 结构差异的电泳方法该方法主要包括: ( 1) 丙烯酰胺和亚甲基双丙烯 酰胺的新配比; ( 2) 分离DNA 片段的最佳凝胶浓度; ( 3) 电泳条件; (4) 脱色漂洗银染显色过 程实验发现, 该技术对于小麦白粉病抗感特性 测中的小片段和长度相差100bp 以下的线性 DNA PCR 扩增结果的分辨效果较好应用该技术在抗感品种间已经发现了DNA 水平上的差异 小麦 白粉病 琼脂糖凝胶电泳 聚丙烯酰胺凝胶电泳 2 ( polyacrylamide gel, 411 015Brock F ( BC F ) 5 2 5 PAG) DNA Brock 015 , [ 1] DNA( 5 411 2 , ~ 500bp) , , 4 5 1bp DNA , DNA 12 , DNA ( Agarose) ( Acr) [ 1] , ( Bis) (Tris) N, N, N, , N(TEMED) 20% 5% ; ( borio acid) DNA ( EDTANa2) ( NaOH) ( AP) RAPD , , DFD ( , , ) , DYY , ( 200mm ! 200mm, ) , , 1 13 DNA RAPD 11 131 小麦总体DNA 的提取 10 , : 411; , 22~ 24 ∀ 5~ 6cm DNA :: * ( 003701111) ( 003122011 Stew