三维导数荧光光谱总体积积分法同时测定多环芳怪 - 上海有机化学研究所.pdf

化学学报 ACTA CHIMICA SINICA 1996, 54 , 772-776 三维导数荧光光谱总体积积分法同时测定多环芳怪 许金钩本 看ß 远长长 王乐天 陈国珍 林竹光 (厦门大学化学系 厦门 361005) 摘要 本文提出了一种运用 Montc - Carlo 积分求算总荧光强度的三维导数荧光光谱法总体积积 分法，并应用于多环芳:怪茶、民、芜的同时测定.结果表明，三维导数荧光光谱总体积积分法的选 择性较三维荧光光谱有进一步的提高，总体积积分法的灵敏度比常规单点法提高 10-20 倍. 关键词 二维导数荧光光谱， Monte - Carlo 积分，多环芳炬 三维荧光光谱是近十几年来发展起来的荧光分析新技术[I] ，由于它反映了发光强度随激 发波长和发射波长变化的情况，因而能较完整地反映出光谱信息[卜41 三维荧光光谱不仅叮 用来进行光谱指纹定性分析[5] ，而且可用于多组分1昆合物的定量分析.本文首次提出三维导 数荧光光谱总体积积分法，三维导数荧光光谱是将兰维荧光光谱求导，求导后谱图的特征不仅 进一步增强，而且可以克服一些基体效应，结合总体积积分法(简称总积分法)用来同时测定多 环芳怪秦、比、芜.结果表明，兰维导数荧光光谱总体积积分法的灵敏度较常规单点法都有较 大的提高，成功地应用于茶、比、芜的同时测定，虽然灵敏度较三维荧光光谱总体积积分法[61 略低，但选择性有明显的提高. 1 原理 a 般荧光分析法是利用荧光峰的强度进行定量分析，称之为单点法. -二维导数荧光光谱 总体积积分法是将三维荧光光谱求导，根据谱图的特征，选择荧光物质特有的区域进行积分得 到总体积积分值，然后进行定量分析.采用 Monte - Carlo 积分方法原理如图 1 所示.随机点 分布于空间某一区域，在该区域任意位置上出现的几率是相同的.在选定的某-激发 发射 区域，将出现在荧光峰内的随机点所对应的荧光相对强度值累加起来，得到荧光总体积积分值 . Monte - Carlo 方法的种子数和采样点数分别选择为 256 和 5000. 三维导数荧光光谱总体积 积分法灵敏度不仅较单点法有较大的提高，相比于三维荧光光谱总体积积分法[6] ，方法的选 择性明显增强. 2 实验 2.1 主要试剂与仪器 配制菜、比、芜标准溶液，浓度依次为 1 x 10 - 6 mol . dm - 3 (乙醇助溶)， 1 x 10 - 3mol . dm - 3 1994 - 10 - 24 收到修改楠 1995 - 03 - 10 收到本文系l母家自然抖学基金资助项叫. 兴长现在南月大学应用化学研究所 L作， 化学学报 ACTA CHIMICA SINICA 1996 773 (乙醇溶液)， 6μg/mL( 乙醇溶液)，用时进 a 步 用水稀释.试剂均为分析纯，水为二次重蒸 水，乙醇为重蒸乙醇 .IBM PC/XT 微机联用 Hitachi - 650 10S 荧光分光光度计及自编数据 采集程序(12bit A/D). 2.2 实验方法 于 25mL 容量瓶中加入 2.0mLTris 缓冲 -ON 液，一定量的茶、正、花标准溶液或混合液，在 Hitachi - 650 10S 荧光分光光度计上进行三维 荧光光谱扫描(激发波长和发射波长间隔分别 写 为 5 和 lnm) ，三维导数荧光光谱由改进 Savitzky - Golay 法求得，激发和发射狭缝均为 5nm. N 3 结果与讨论 230 3.1 茶、