乙肝病毒表面抗原SA-28融合基因在酵母中表达的分析.pdfVIP

乙肝病毒表面抗原sA一28融合基因在酵母中表达的研究 摘 要 本论文工作包括两反面的内容 一．乙肝病毒表面抗原SA-28融合基因在酵母中的组成型表达 以酵母载体YFD59为基础，将乙肝病毒表面抗原sA一28融合基因正向插 构建成三个带有不同拷贝数和不同插入方向表达单元的表达载体： Y16，Y19两株酿酒酵母菌。对不同工程菌株进行表达水平的测定，我们选到了 高效表达乙肝病毒融合抗原的菌株，并发现带有以YFD59为基础的表达载体的 1为基础的表达载体的工程菌。这可能与相应 工程菌表达水平高于带有以pHCl 的表达载体在酵母细胞中的稳定性高低有关。 关键词： 酵母，乙肝病毒表面抗原，组成型表达 二．SA-28合成基因及DNAshuffling改造探索 根据酵母高表达优越密码子我们对于SA一28融合基因的密码子进行了修 改，合成得到一条新的基因。将新的和原来的SA一28融合基因进行拼接，并 将拼接的基因置于酵母杂合启动子PAOm一㈣H控制下，构建高表达载体 和N。bSSl进行DNA shuffling，得到各种不同的基因序列。将这些不同的基因正 化DBY746，研究其表达。 关键词：酵母，乙肝病毒表面抗原，密码子偏爱，DNA shuffling 圣墅堕量壅堑苎堕!垒二垫壁宣苎里垄壁墨!室苎塑堑塞 Abstract consistsoftwo Thisthesis parts： modified SA一28directedaconstitutive ofthe HBsAggene by 1．Expression in promoteryeast the SA一28ina vector modified yeastexpressioncarrying By HBsAggene placing ail andterminator constructed PmKI TADHl，we expressionplasmid promoter intofour wastransformed YFD59一LSSl．It stains，BJ2168，DBY746， yeast inserted cassettefromYFD59一LSSlwasthen JRYl88，BJ3505．The expression a into site stable theBamtTiof vectors， yeastplamidpHCll．Threeexpression and were obtained．They