促皮生软膏的药物学方面的实验分析.pdfVIP

促皮生软膏的药物学方面的实验研究 硕士研究生：钟红玲 指导教师：徐奇玮教授 专业名称：药理学 摘 要 “促皮生软膏”是以蜂蜡为主药的纯中药组方。经过大量的临床研究证明， 促皮生软膏除了对各种烧伤、烫伤、皮肤皲裂、皮肤溃疡有显著疗效外，对严 重的下肢静脉曲张，放射性损伤，糖尿病所致的顽固性皮肤溃疡，褥疮等均有 明显的治疗效果。 本文主要对促皮生软膏剂主药蜂蜡进行了药学基础研究，旨在为促皮生软 膏的临床研究及蜂蜡的开发利用提供实验资料。 方法和结果 ～、蜂蜡的理化性质的研究 通过采用物理方法和化学方法，对蜂蜡进行了一系列理化性质的测定，蜂 蜡的各项理化性质指标的平均值分别如下，密度为O．957，熔点为65．3℃，折 测定结果表明，实验所用蜂蜡的各项理化指标均符合中华人民共和国行业标准 10190一93的规定。 一蜂蜡SB／T 二、蜂蜡的化学组成的研究 文献记载，蜂蜡是由烷烃、酯类、游离酸等组成的混合物。本文采用气相 色谱．质谱联用分析(QP505A型号Gc／MS联用仪，包括GC—17A气相色谱议， GLAss～5000，色谱工作站)，对蜂蜡中的烷烃、脂肪酸和脂肪醇进行了系统的 研究，分别得到它们的总离子流色谱图，然后通过计算机标准谱库对各峰进行 检索，共鉴定出7种烷烃化合物．分别为二十三烷烃，二十五烷烃，二十七烷 烃，二十九烷烃，三十一烯烃，三十～烷烃，三十三烷烃；11种脂肪酸化合物， 分别为十四碳酸，十六碳酸，十八碳酸，十八碳烯酸，二十碳烯酸．二十碳酸， 二十二碳酸，二十四碳酸，二十六碳酸，二十八碳酸，三十碳酸；5种脂肪醇 化合物，分别为二十四烷酵．二十六烷醇，二十八烷醇，三十烷醇，三十二烷 醇。通过以上分析结果，为确定蜂蜡的质量标准提供了实验基础。 三、蜂蜡中软脂酸的含量测定 通过对蜂蜡的化学组成的研究，确定了通过测定蜂蜡中软脂酸的含量，来 确定蜂蜡的质量标准。 采用毛细管气相色谱法(GC一17A气相色谱议，包括C—R7A数据处理机)，精 密称取软脂酸对照品，加入20％BR／cH，OH溶液进行甲酯化，然后加入2ml 正己烷，2m1饱和Nacl溶液，振摇混匀，静置片刻，取上清液l“l进样。以样品 浓度(0．8、2．0、4．0、6．0、8．0m∥m1)为横坐标，峰面积为纵坐标做回归曲线， 并得到回归方程为Y=242509．41x+17837．66，相关系数间．9997 取标准对照品溶液，连续进样5次，进行精密度试验，得RSD为1．0l％。 精密称取蜂蜡样品5份，首先加入0．5mol／lKOH／CH，OH溶液进行水浴 皂化至完全(油滴完全消失)。再离心，取上清液，加入20％BF3／cH；OH溶液 甲酯化，然后加入2ml正己烷，2ml饱和Nacl溶液，振摇混匀，静置片刻，取上 清液1仙l进样，测定蜂蜡中软脂酸的峰面积，根据回归方程，计算出蜂蜡中软脂 酸的平均含量为19．20％。 采用外标加入法测得加样回收率为93．32％，RSD为1．89％ 四、软膏中蜂蜡的含量测定 精密称取软膏样品5份，首先加入O．5mol／L KOH／CH，OH溶液进行水浴 皂化至完全(油滴完全消失)，离心，取上清液加入20％BE／CH，oH溶液进行 甲酯化，加入2ml正己烷，2ml饱舍NaCl溶液，振摇混匀，静置片刻，取上清液 1111，采用同样的气相色谱条件测定软膏中软脂酸的峰面积，根据回归方程， 通过换算，得出软膏中蜂蜡的百分含量为21．34％． 五、促皮生软膏的药效学方面的研究 取健康大鼠，雌雄各半，采用切开皮肤，涂冰醋酸的方法形成缺损性慢性 皮肤溃疡模型。观察促皮生软膏组、凡士林对照组、空白对照组对溃疡皮肤生 长的影响情况，每隔3天测定溃疡皮肤面积。结果表明，促皮生软膏组与其他 的两个对照组相比较，能明显促进皮肤生长，溃疡面愈合，到第九天。促皮生 软膏组的溃疡皮肤几乎完全恢复正常。 六、结论 通过气相色谱．质谱联用的分析，鉴定了蜂蜡中各种烷烃、脂肪酸、脂肪 醇类化合物，通过比较得知蜂蜡中软脂酸的含量较高丽且相对稳定，并且软脂 酸对照品比较容易得到，因此通过测定蜂蜡中软脂酸的含量，建立促皮生