同种异体胎兔软骨细胞治疗膝骨性关节炎的实验分析.pdfVIP

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同种异体胎兔软骨细胞治疗膝骨性关节炎的实验分析

中文摘要 察,切取双侧股骨髁部,固定、HE染色、天狼猩红染色 及免疫组织化学染色,光镜下观察各组动物标本病理改 变,对膝关节修复软骨组织进行组织学评分,zP.N定膝关节 修复软骨组织厚度,所有数据采用SPSSIO.0统计软件包 进行统计学检测,PO.01有显著性差异,以及对膝关节 软骨修复组织进行免疫组织化学鉴定。 结果: 1膝关节大体标本观察结果 实验组:膝关节无挛缩、粘连、新生物及骨性关节炎 征象,关节囊无红、肿、热等炎症现象,滑膜无水肿、无 充血,色泽正常。术后4周,软骨损伤部位有修复但未填 平,表面粗糙,色白,与周围界限仍较清楚,按压阻抗小。 术后8周,软骨损伤部位的修复组织与周围的关节面几乎 平齐,组织较厚,韧性较强,色泽更接近正常的软骨组织, 界限清楚。术后12周,缺损处洞形凹陷消失,原凹陷处 填充的修复组织与周围的关节面几乎平齐,关节面较光 滑,修复组织较厚,色泽略白,韧性已经与周围的正常软 骨组织的差别不大,按压时阻抗大,边缘模糊,界限不清。 术后24周,修复组织与周围的关节面平齐,关节面光滑, 修复组织较厚,色泽为正常软骨的蓝白色,韧性与正常软 骨组织无差别,按压时阻抗大,修复组织与周围正常的软 骨已完全一样,边缘已辨认不出。 对照组:术后4、8周,缺损处的洞形凹陷依然存在, 软骨损伤部位未填平,软骨损伤部位的修复组织为纤维组 织覆盖,呈透明的片状物,色白,与周围分界清楚,较薄 且柔软,按压无阻抗,与周围软骨组织未愈合。术后12 ±查塑墨 ———————————————————————————————●———————————————一。 一 周,缺损区能明显辨认出来,色白,为纤维组织修复,阻 抗很小,与周围软骨组织未愈合,表面不平整、不光滑, 呈瘢痕样改变。术后24周,缺损区仍能辨认出来,缺损 边缘清楚,有凹陷或蘑菇状隆起,关节面粗糙,不光滑, 呈瘢痕样组织外观,阻抗小,与周围软骨组织未愈合。 2膝关节软骨修复组织学评分结果 实验组与对照组:术后4周、8周、12周、24周, 差值均数分别为3.0、2.8、2.6、2.8,差值的标准差分别 为1.38、1.22、1.19、112,将各组评分结果进行统计学 处理,数据符合正态性分布且方差齐,应用配对设计差值 均数的t检验,各时期实验组得分均优于对照组(P 0.01)。 3膝关节软骨修复组织厚度测定(RT/CATD×100%)结 果 实验组与对照组:术后4周、8周、12周、24周, 差值均数分别为32.6、29.5、27.1、33.9,差值的标准差 分别为11.04、4.82、7.70、5.68,将各组评分结果进行统 计学处理,数据符合正态性分布且方差齐,应用配对设计 差值均数的t检验,各时期实验组得分均优于对照组(P 0.01)。 4膝关节软骨修复组织免疫组织化学鉴定结果 实验组在术后4周、8周、12周、24周各时间点, 缺损处的修复组织均可见大量II型胶原阳性染色的软骨 细胞,胞浆被染成棕黄色,随着时间的延长,软骨基质中 II型胶原阳性染色范围明显增加。对照组在术后4周、8 周、12周、24周各时间点,缺损处的修复组织均未见II 中文摘要 型胶原阳性染色的软骨细胞。 结论:透过将兔膝关节l枣囊位嚣囊管型鄹定,膝关节 制动6周,见兔膝关节殿骨髁郏负菱处的软骨退变,退变 的关节软骨表瑟不光滑,缺乏光泽,颜色浊是,嚣在其他 区域,表现为正常的表露平滑光洁。瘸理改变包括表露糜 烂和不规则、软骨细胞数嚣减少,排列紊熬,并有戏簇现 象,可觅到基质染色的改交,并伴随者蛋鲁多糖静进行性 丢失。偏振光温微镜下凳胶濠纤维撵剜紊舌乙,出现l型胶 深,上述符合OA的特征,证实本实验方法可复嗣膝骨性 关节炎模受。 本次实验通过用磨钻去除邋交软骨、冲洗关节液中的 酶、细胞因子、自由基等影响软骨的生纯因素,再将同种 异体胎兔软骨细胞体外培养、扩增,与兔血纤维蛋白凝胶 形成混合物,移橇于膝关节内软骨退变区,成功修复了退 变的关节软骨,新生出透明软骨,治疗轻中度OA。软骨 退变区修复的软骨组织中,软骨细胞形态、数量、分布以 及软骨基质的分布与正常软骨组织无差异,将实验组与对 照组的修复软骨组织厚度及组织学评分进行统计学处

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