椎板切除术后脊柱的不稳对硬膜外瘢痕形成的影响和预防的实验分析.pdfVIP

椎板切除术后脊柱的不稳对硬膜外瘢痕形成 的影晌和预防的实验研究 硕士研究生： 王守丰 指导教师： 李正维 教授 指导小组： 敖强 副教授 慈元 副教授 专业名称 外科学 摘 要 目的 分析比较椎板切除术后脊柱的不稳是否是影响硬膜外瘢痕形成的重要 原因以及椎板切除术后钢丝固定与自体移植脂肪对硬脊膜外瘢痕形成的影响。 方法：SD大鼠128只，随机分为16小组，每组8只，行L3全椎板切除，分 别为棘突间钢丝固定与移植脂肪组(Ⅱ组)，单纯钢丝固定组(I组)．移植脂肪组但 组)及对照组(C组)。术后2、4、6、8周处死动物，分别大体观察。观察评分标准 采用Rydell大体评分标准。瘢痕面积测定：取Masson三色法染色切片每组8张， 共128枚，用American image．proptus计算机图象分析系统对病理切片中瘢痕面积 进行测量。硬膜外侧瘢痕的测量范围：自硬膜后缘向后1／2个椎管前后径处划一水 平线，测量该线前方的所有瘢痕面积，将每张切片的瘢痕面积相加求值后除以椎 间盘的面积，即为该标本的瘢痕面积指数。成纤维细胞及炎性细胞的测定：HE染 X)，直接输入计算机，在显示器上 色组织切片取同一放大率的瘢痕组织图像(640 用鼠标器对成纤维细胞和炎性细胞进行计数。为了减少误差，每标本计数3个不 同的视野，一个位于中央，两个位于边缘。且由一位不知实验过程及实验原理的 病理医师计数。免疫组化方法：病理组织切片以CD34单克隆抗体作为第一抗体， 按照免疫组织化学SP步骤进行，DAB显色，苏木素复染，每组用0．01mmol／1的 PBS液替代CD34抗体作阴性对照(试剂购自于武汉博士德公司)，应用免疫组化 显示血管，对不同时期的血管生成情况及早期的炎性反映情况进行观察。生化定 量胶原蛋白含量检查：应用许志勤f2增的组织羟脯氨酸测定的改进方法，将大体观 X 察时标本一侧切取2mm 2mm大小的瘢痕组织脱水、脱脂、水解。使所有的氨基 酸肤链全部断裂，成为游离氨基酸，取标本后加入羟脯氨酸显色剂，经紫外线分 光光度计澳4定羟脯氨酸的含量。根据胶原纤维中羟脯氨酸的含量比例(13．锄)推 ’1‘ 算出胶原纤维的含量。 结果：大体观察，于2周及4周时，I组粘连程度低于C组，且有统计学意义 0K0．05)。8周时，Ⅱ组粘连程度低于F组，且有统计学意义(po．05)。2～8周时， I组瘢痕面积小于c组(po．05)。6墙周时，Ⅲ组面积小于F组，且有统计学意义 数量高于F组；4,-．6周时，Ⅲ组炎性细胞低于F组；4周时I组炎性细胞低于C组； 2～8W时，I组与C组的胶原蛋白含量比较时无统 以上均有统计学意义(p0．05)o 计学意义。4W时，I组的血管含量少于C组(rK-o．051。 结论：脊柱的不稳可能是加重椎板切除术后硬膜外瘢痕形成及延缓瘢痕成熟 的重要原因，移植脂肪及稳定脊柱在椎板切除术后早期有预防硬膜外瘢痕形成的 作用。 关键词：椎板切除术 硬脊膜 瘢痕形成 固定 脂肪移植 ·2‘ Oilthe instability Investigationofimpactofspinal epiduml fibrosisand of fibrosis epidural precaution Graduate