氧化苦参碱抗肝纤维化的实验分析.pdfVIP

中文摘要 氧化苦参碱抗肝纤维化的实验研究 (肝纤维化是各种病因肝病发展为肝硬化的共同病理过程。细胞外 基质(extracellular 病理改变。近年来，随着分子生物学的发展，对肝纤维化的病理生理 stellate 有了进一步的认识，证实了静止状态的肝星状细胞(Hepatic like cell． MFBLC)，后者是肝纤维化时细胞外基质的主要细胞来源，并可产生 一系列细胞因子自分泌激活静止的HSC，其中转化生长因子B1 之一。肝枯否细胞(Kupffer 化启动的关键因素。研究HSC活化的机理，并设法阻断或抑制其活 化，可以减少ECM的增加，从而减缓肝纤维化的发展。肝纤维化是 慢性肝病进一步向肝硬化发展的中间环节，因此，阻止和逆转肝纤维 化的发展，不仅能降低肝脏损伤程度，且能防止肝硬化的发生。在我 国，肝纤维化的病因主要是乙型肝炎病毒慢性感染所致的慢性乙型肝 炎。肝纤维化理想的治疗方案应包括：①祛除损伤的刺激；②抑制肝 脏的炎症反应：③抑制肝星状细胞的活化；④促进基质的降解。但目 前临床应用缺乏理想有效的抗肝纤维化的药物。近年来的研究发现， 中药在抗肝纤维化治疗中有相当的潜力。氧化苦参碱 免疫调节、抗肝炎病毒作用、减轻肝脏的炎症反应作用及抗肝纤维化 作用，但其抗肝纤维化的机理尚不十分清楚椿研究目的主要是研究 氧化苦参碱的体外抗肝纤维化作用，通过氧化苦参碱 stellate cell， HSC)的影响及对活化的肝枯否细胞(Kupffercell，KC)对星状细胞的旁 分泌激活的影响，探讨氧化苦参碱抗肝纤维化的作用机理。 第一部分氧化苦参碱对活化的HSC的影响、 f分离大鼠的肝星状细胞进行体外培养，传一代至细胞长成亚单 层，药物直接添加于活化的肝星状细胞，观察氧化苦参碱不同浓度对 细胞的毒性作用：以MTT比色法及3H．TdR掺入法检测细胞增殖； 貂肺上皮细胞株．MvlLu增殖抑制试验检测转化生长因子．B1 (TGFl31)的分泌总量及其活性；免疫细胞化学染色法观察I型胶原、 变化 本部分的结果：1．氧化苦参碱对HSC的代谢毒·性较小，不同药 的变化差异无显著性；2．对活化后的大鼠HSC的增殖，氧化苦参碱 从10‘5mol／L起既有抑制作用；3．对HSCI型胶原的分泌有抑制作用， 对I型前胶原mRNA的表达没有影响；4．可减少HSC TGFl31的分泌 TI]RI、Tp砌I及TIMP．1的表达无影响。寸～ 第二部分KC对ttSC旁分泌活化及氧化苦参碱对其的影响： (分离CCl。损伤肝KC，进行体外培养，收集损伤肝KC条件培养 KC旁分泌激活HSC的影响，生物学方法检测Oxy活化的KC分泌 TGF口1的影响。． 本部分的结果： 1．急性损伤肝KC对HSC的增殖有促进作用： 2．氧化苦参碱可抑制KC对HSC增殖的促进作用：3．氧化苦参碱可 本研究两部分的结果表明：氧化苦参碱可抑制活化HSC的增殖， 化苦参碱具有一定的抗肝纤维化作用。 一 一—————————————————————————一————一 关键诃： 氧化苦参碱卜肝纤维∥肝星状细胞7I型胶原■GFBl TIMP．1肝枯否细胞旁分泌RT．PCR