氧化应激对SIRT2的转录调控机制的分析.pdfVIP

摘要 摘要 一种NAD+(烟酰腺嘌呤二核苷酸)依赖的组蛋白／非组蛋白去乙酰化酶 基因家族在维持基因组的稳定性、DNA损伤修复、有丝分裂调控，抗凋亡，延 长寿命中发挥重要作用。近年来大部分的前期研究将注意力集中到SIRT2的生理 功能上，这个家族成员主要定位于细胞质中，但是他的生理功能却还不是很清 楚。有趣的是，在哺乳动物中，在进行能量限制的情况下，SIRT2的表达量显著 增加，但是其机制和生理学意义都还不清楚。在本研究中，我们报道了随着年 龄的增大，人卵巢中的SIRT2的含量升高，然后我们就提出了一个假设：在卵巢 中SⅡ玎2是由于氧化应激而被上调的，并且验证了这一假设。 情况。然后用双荧光报告基因检测系统检测不同长度的启动子的转录活性。这 些不同的重组启动子被瞬时转染到人胚肾细胞中，并用TR717生物发光仪来检 测。我们将各种化合物以及H202加入到培养基中诱导基因启动子的转录。我们 测转录结合位点。 结果：在本部分的实验工作中，我们证明了氧化应激H202确实可以激活 SIRT2基因的转录，并对SIRT2基因的启动子序列进行了分析，采用双荧光素酶 报告基因分析系统及系列截短及缺失分析的方法，我们克隆了并逐步截短了人 预测并且利用RNAi和DNA片段缺失的方法证明了这段序列中的GATA．3转录因 子的结合位点正是对H202调控SIRT2基因表达产生反应的关键序列。 结论：SIRT2在衰老的小鼠和人的卵巢中表达量增加。体外实验表明，SIIm 是Sirtuins家族中唯一一个对氧化应激起反应的亚型。虽然在SIRT2的启动子区域 中存在多个API结合位点，我们还是以外的发现GATA3结合位点是氧化应激激活 SIRT2转录的位点，但是SIRT2被激活之后是如何影响细胞寿命的还需要进一步 摘要 的研究。 子，双荧光素酶基因检测系统 Abstract Abstract Sirtuins information Background：ne regulator family(silence proteins，SIRTs) functiOIlSas nicotinamide-adenine histone classIllHDACsarewdlconserved diverse deacetylases(HDAC)．The throughout from tohuman．NumerousstudiesdemonstrateSirtuinsan species ye弱t play rolein lifeactivitiessuchasmaitainaceof importantmany stability, genomic of of resistanceand DNA，regulation repairingdamaged mitosis，apoptoticlongevity． Most studieshavefocusedon functionsofthoseSIRTsother previous physiological thanSIRT2