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水体污染中常见食源性致病菌的PCR分子检测分析
内容提要
食源性致病菌是以食物为载体，导致人类发生疾病的细菌。针对传统
的细菌检测方法，如生化培养、分离鉴定、免疫学技术等，操作繁琐，需
时长、特异性不强、灵敏度不高等问题，本研究在进行特异性引物设计后，
建立起沙门氏菌(Salmonellasp．)、志贺氏菌(Shigellasp．)、铜绿假单胞菌
(Pseudomonas
EHEC)和副溶血弧菌(Vibrio
PCR检测技术，通过优化测定条件，对10个属的35株常见致病菌、条件
致病菌和实验室人工污染的饮用水、河水、池塘水等样本进行检测，这5
种致病菌均有清晰、特异的预期条带产生，并经序列测定验证同源性，表
明本研究建立的反应体系及条件合适，筛选的引物高度特异。采用PCR
技术对5种致病菌进行检测，每个样品所需时间为5～8h，单重PCR技术
100cfu．mL～、志贺氏菌
检测灵敏度分别为：肠出血型大肠杆菌0157
地缩短了检测时间，适用于大通量样品的检测研究。此外，本研究在建立
了检测的优化体系和条件的基础上，构建了单重PCR和多重PCR检测试
剂盒，可推广应用于环境监测、水源检测、食品卫生监督、商品检验检疫
等领域。
关键词：单重PCR：多重PCR：食源性致病菌：检测；试剂盒
II
Abstract
Food—bornebacteriaI weredefinedtobe that
pathogens pathogens
couldleadtodiseases food．Theofconventionalculture
through steps
methodsand
biochemicalconfirmationwere need
trivial，and
manydays
to theresult．The of hadthe of
acquire techniqueimmunologyproblems
and the
specificity
sensitivity．Wedesigned
specific
the PCRand PCRdetection
developedmonoplex multiplex techniques
for fivekindsof
detecting bacterial whichwereSalmonella
pathoges
蔓p．、鼬igellasp．、Pseudomonas Ol 57
andV／briorahaemo，vtieusin the and
water．Throughoptimizedsystem
conditionof and detection
monoplex-PCRmultiplex．PCR，thesystem
andidentificationconditi
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