Galanin（甘丙肽）及其受体在成年小鼠脑内神舭部位的表达及对神经干细胞分化的作用.pdfVIP

第 41卷 第 5期 分 子 细 胞 生 物 学 报 Vo1．41．No．5 2008年 10月 JournalofMolecularCellBiology October2008 G删1in( ) 体在成年／J、鼠脑内神舭 部位的表达 及对神经干细胞分化的作用 马 骥 单 良 于玲莉 袁崇刚 (华东师范大学生命科学学院生理学研究室，上海 200062) 摘要 Galanin (甘丙肽)是一种在 中枢神经系统 中广泛分布的神经肽 ，功能涉及摄食 、睡眠和觉 醒、疼痛、认知和生殖等各方面 我们在成年小鼠脑 的神经细胞新生部位如 SVZ，DG和 RMS发 现有galanin及其受体的mRNA表达，同时在SVZ来源的神经干细胞中也检测到有galanin及其受 体的表达 细胞实验 中．在分化后特定时间段 GALKO小鼠来源的神经干细胞产生神经突的细胞 比例及神经突的长度明显小于正常小鼠来源的神经干细胞 ．而加入 galanin或受体激动剂 GAL2— 11后 ．该神经干细胞则在产生神经突的细胞 比例及神经突的长度都明显上升。受体拮抗剂 M35的 添加可减弱 galanin或GAL2一ll所产生的作用。这些结果表明galanin及其受体与神经干细胞的分 化及神经突的生长有着密切 的联系．并可能参与了神经系统的发育。 关键词： galanin galanin受体 mRNA表达 神经干细胞 神经突生长 Galanin (甘丙肽)是 由29—3O个氨基酸构成 1 方法与材料 的神经肽 ，广泛分布于中枢和周 围神经系统 它 在下丘脑周 围核群 ，丘脑 、杏仁核 、蓝斑 、隔核 1．1 动物 等 中枢区域都有着较强的表达 ．主要参与递质 C57BL／6J小 鼠购 自上海西普尔一必凯实验动物 释放、摄食、睡眠与觉醒 、疼痛和生殖等方面生 中心 ．以此 品系为基础构建 的Galanin基因敲除 理功能的调节_3_加] Galanin的功能 由3种 G蛋 白 (GALKO)小 鼠获 自澳大利亚墨尔本大学 Howard 结合受体介导：GAL-R1．GAL-R2和GAL-R3~11—13] Florey研究所 Andrew．L．Gundlach教授馈赠 动物 近来研究表 明，galanin还参与促进神经系统神 控制饲养在 24。=【．光暗 12h交替的环境中 经 (元)的生长 ，发育和再生，如在外周痛觉神经损 1．2 原位杂交 伤后背根神经节galanin表达有较强的上调_14]：前顶 以4％isoflurane麻醉 8周龄的野生型成年小 叶皮质切除后在丘脑和 中缝背核有 galanin的高表 鼠 (n=3／组)，迅速断头 ，分离脑并置人液氮 中快 达l15]：galanin能促进 PCl2细胞和背根神经节感觉 速深冻 ，实验前所有脑组织保存于一80℃冰箱 切 神经元的神经突的伸长lj6，17]，等等 。而 galanin及 片时 ，使用 Leica冰冻切片机在一16℃下进行冰冻 其受体的表达在大 鼠脑 内细胞新生部位 (如SVZ． 矢状切片 (141xm1 RMS)的发现 [18]更使人们认为 galanin及其受体 检测 galanin及其受体的寡核苷酸探针 由Sig— 与神经系统 的发育和损伤修复有着密切的联系 ma—Aldrich公司合成 探针经 Genbank和 NCBI／ 我们通过实验检测 了galanin及其受体在小 鼠 NIHBlast验证 了其与 galanin及其受体 cDNA 的 脑内神经细胞发生部位以及神经干细胞 中的表达 ． 100％ 同源性 。利 用末 端 脱 氧核 苷 酸 转移 酶 并应用 galanin受体 的激动剂 以及拮抗剂分别作