三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞内Ca^2＋的变化.pdfVIP

动物学报 54(5)：885—889，2o08 Ac￡0． 。 c口Jsn 0 三疣梭子蟹精子顶体反应前后胞 内Ca2+的变化* 朱冬发 “ 沈丽萍 沈建明 吴 琼 宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室，浙江 宁波 3152l1 摘 要 应用激光扫描共聚焦显微镜 ( cM)和 nuo．3／AM荧染技术对三疣梭子蟹精子顶体反应前后的胞内 ca2变化进行了观察和检测。结果显示 ，在精子顶体反应过程中，胞 内Ca2主要分布在细胞核、穿孑L器和胞质 膜残存处 ，胞内ca2浓度 ([ca2]；)总体上呈现先上升后下降的趋势。顶体反应前精子的平均荧光强度为 35．95±5．71；穿孔器前伸、顶体囊膜翻转阶段精子的平均荧光强度为 66．8O±7．35；顶体囊膜脱落、顶体丝形成 阶段精子的平均荧光强度为3．87±2．82；上述各阶段间精子荧光强度有极显著差异 (PO．01)。顶体反应穿孔 器前伸、顶体囊膜翻转阶段的精子相比顶体反应前精子，[ca2]；显著提高；而在顶体囊膜脱落、顶体丝形成阶 段，[ca2]i则急剧下降，只在顶体丝基部胞质膜残存处有微量 ca2存在。初步探讨了三疣梭子蟹精子顶体反应 前后胞 内ca2变化的功能 [动物学报 54 (5)：885—889，20o8]。 关键词 三疣梭子蟹 精子 顶体反应 激光扫描共聚焦显微镜 胞 内Ca2 Changesin intracelllllar Ca2 0fspem f0re-and-aftacros0me reacti0ninthes mmiIlgcrab Po ，l 臼 6rc s ZHUDong．Fa ，SHENLi—Ping，SHENJian—Ming，WUQi0ng KeyI丑b0rat0ry0fAppliedMarineBiotechn0l0gy0fMinistr)r0fEducati0n，NingboUniversity，Ningbo 3152l1，China Abstract Theacr0somereactnprocessofspem inu1eswimmingcrab )0I盯仉s‘# 曲erc cts‘(】Ⅵiers)consists0ff0ur consecutivestages：(1)sweuing0ft|le印icalcap；(2)eversion0ft}leacmsomalvesicle；(3)f0rwardelongation0ftlle pedbrat0riumandreversaloftheacrDsomalvesiclememb舢 e；and(4)sheddingoftheacIDsomalvesicleⅡlembraneandbmation theacms0malfil啪ent．Intllepregentst1ldy，Lasersc眦ningCo calMic∞scope(LSCM)wasusedtoimage8peⅡna0【zoa stainedwiⅡ1nuo．3／AM atdi妊rentst卯 s0fthefre．aJ1d．aflacm8omereacti0n．nuo．3，AM wasusedastheC nu0rescence indicator．The488nm arg0n la8erwasusedf0rexcitati0nandtheemittedⅡu0rescencewas526nm．0naccount0fthestability0f spem duringt}Leacro∞mere＆ction，weselectedspennat出reestages(pre—acr0somereaction，如e3rdstageand也e4thstage0f tIleacf0sornereaction)t0analyzeintraceⅡularC chan s．Theavemgenuorescenceintensity0f8pe珊sintlleab0ve．ch0sen stageswere35．95±5．71，66-80 ±7．35and3．87士2．82 respectively．Avera nuorescenceintensitiesamongtllese8tages exhibited啦 iantdifferences(P0．01)．，rheintracelI