提取多糖时.ppt

将香菇发酵液过滤，洗涤滤渣（菌丝体），再将香菇菌丝体于95~100℃下烘干，然后粉碎成小块。称取菌丝体（干）30g，加600mL水，于96~100℃水浴2.5H，离心（4000r/min，10min钟），收集上清夜； 方法1： 沉淀物加水600mL，于96~100℃再次水浴浸提2.5h，离心收集上清夜，合并2次的离心上清夜，真空浓缩至4~5mL，加20mL无水酒精混匀，静置过夜，弃上清夜后，用85%酒精洗涤2次，再弃上清夜，晾干沉淀物即为香菇多糖。30g菌丝体经该工艺提取，可得480mg香菇多糖，收率为1.6%。 香菇发酵液经离心（3000r/min，10~15min钟），弃上清夜得菌丝体。取菌丝体2Kg（湿重），用沸水（90~100℃）浸提3次，合并3次的热水提取液，加入3倍体积的96%酒精，充分混合，置于4℃下静置沉淀，弃上清夜，沉淀晾干后为棕色无定形粉末，即KS-2粗品。 方法2： * * * * * * * * * * * * * * * * 一、肝素（Heparin） 心脑血管疾病是人类的头号疾病杀手。随着人们生活水平提高带来的营养过剩、全球环境的恶化、生活节奏加快、人口老龄化加剧，致使全球心脑血管疾病的发病率和死亡率正逐年增高，肝素的出现为众多心脑血管疾病患者创造了生命的奇迹。  目前肝素是世界上最有效和临床用量最大的抗凝血药物，主要应用于心脑血管疾病和血液透析治疗，其中，其在血液透析治疗中是唯一有效的特效药物。 临床应用及研究显示，肝素除具有抗凝血作用外，还具有其他多种生物活性和临床用途，包括降血脂作用、抗中膜平滑肌细胞（SMC）增生、促进纤维蛋白溶解等作用。 此外，低分子肝素是由肝素原料药作为原料进一步加工成的一大类抗血栓的药物，具有更为广泛的临床医学用途，成为治疗急性静脉血栓和急性冠脉综合症（心绞痛、心肌梗塞）等疾病的首选药物。 肝素是世界上迄今为止已知的分子结构最复杂的化合物，短期内无法人工化学合成，目前只有来源于猪小肠粘膜的肝素能够用于临床治疗。 肝素原料药的原料是肝素粗品，其提取只能源自健康生猪的小肠粘膜，由于含有大量杂质蛋白、杂质核酸、微生物等杂质，需经过物理和化学提取分离过程，定向获取天然结构基团完整的肝素，从而制成肝素原料药。 肝素钠原料药是标准肝素制剂的唯一有效成分和低分子肝素原料的生产起点，目前肝素制剂只有按照注射给药方式用于临床，这使得肝素原料药需要有很高的纯度，方可保证制剂的用药安全。  中国生猪屠宰量占全球50%以上，拥有全球最丰富的肝素原料资源，我国是全球肝素粗品和肝素原料药的主要生产国，也是全球最大的肝素原料药出口国，拥有美国FDA认证或欧盟CEP认证标准的肝素原料药已呈现供不应求的局面，成为全球下游生产企业青睐的重要资源。 2009年上半年，肝素原料药在我国西药类重点产品出口金额排序中跻身第二位，仅次于维生素C，并超过了扑热息痛、青霉素工业盐等传统出口重点品种。 含硫酸基的酸性粘多糖 三硫酸双糖与二硫酸双糖以2：1比例在分子中连结。 三硫酸双糖中是L-艾杜糖醛酸，二硫酸双糖中是D-葡萄糖醛酸 1、化学结构 白色或灰白色粉末，无臭无味，有吸湿性，钠盐易溶于水，不溶乙醇、丙酮、二氧六环等有机溶剂。是一种含有硫酸基的酸性黏多糖，其分子具有由六糖或八糖重复单元组成的线状链状结构。 性质 药物功能 1.治疗各种疾病并发的播散性血管内凝血早期。 2.预防动、静脉血栓和肺栓塞。 3.治疗动、静脉血栓和肺栓塞，缺血性脑卒中，不稳定型心绞痛（减轻症状、预防心肌梗死），急性心肌梗塞（防止早期再梗塞和梗塞区延展，降低病死率）。 4.人工心肺、腹膜透析或血液透析时作为抗凝血药物。 5.作为溶血栓疗法的维持治疗。 6.用于输血时预防血液凝固及血库保存鲜血等体外抗凝剂。 7小剂量时用于防治高血脂症和动脉粥样硬化。 肝素制备工艺的分离原理 离子交换树脂的分离纯化原理 2、酶解—树脂法 （2）工艺过程 ① 原料处理：将新鲜的猪肠黏膜用清水仔仔细清洗去除内外污物和外部皮肤脂肪后，绞碎成糜状，并在充分搅拌下，加入等量的水混合后，再加入少许浓度为0.01%的防腐剂混合均匀。 ② 酶解：取100kg新鲜肠黏膜加苯酚0.2％。在搅拌下加入绞碎胰0.5％～1％，用40％氢氧化钠液调节pH8.5—9，升温至40～45℃，保温2～3h,pH8，再加5％粗食盐升温至90℃，用6M盐酸调节pH6.5，保温20 min,以布袋过滤，得酶解滤液。 ③ 吸附、洗涤、洗脱：取滤液冷至50℃以下，用6M氢氧化钠调节pH7,加入5kg D—254强碱性阴离子交换树脂，搅拌5h左右，交换完毕，弃去液体，用清水充分漂洗，干净后，再用大约一倍的1.2mol/L氯化钠溶液对