乙型肝炎病毒x蛋白对肝细胞l02增殖及gsk3β表达的影响 - tumor - 肿瘤.pdfVIP

406 　　肿瘤 2011 年 5 月第 31 卷第 5 期　Tumor Vol. 31, May, 2011 DOI:10.3781/j .issn.1000-7431.2011.05.005 Basic Research ·基础研究 β 乙型肝炎病毒X蛋白对肝细胞L02增殖及GSK3 表达的影响 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 1, 2 喻　垚 ，吴婷婷 ，蒋崇亮 ，焦庆昉 ，冯　 涛 1. 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室，重庆 400016 ；2 . 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心，重庆 400016 [摘要]　目的：通过研究乙型肝炎病毒 X 蛋白 （hepatitis B virus X protein ，HBx ）对人肝细胞株 L02 细胞增殖、 细胞周期 以及细胞中糖原合成酶激酶 3β （glycogen synthase kinase 3β，GSK3β ）表达的影响，探讨乙型肝炎病 毒 （hepatitis B virus ，HBV ）相关性原发性肝细胞癌 （hepatoccellular carcinoma ，HCC ）的发生机制。方法：用 HBx 腺病毒 （Ad-HBx ）感染人肝细胞株 L02 细胞后，RT-PCR 法检测 L02 细胞中 HBx 和 GSK3β mRNA 表达 情况；MTT 法检测 L02 细胞的增殖率变化；FCM 法检测细胞周期中各时相所 占比例；蛋白质印迹法检测 HBx 、 总 GSK3β （total-GSK3β t-GSK3β 、磷酸化 GSK3β phospho-GSK3β p-GSK3β 、β- 连环 β-catenin ）以 ， ） （ ， ） 素（ 及细胞用期蛋 白 （cyclin D1 ）等蛋 白的表达水平。结果：Ad-HBx 感染 L02 细胞后，HBx 的 mRNA 和蛋 白均出 现表达，细胞增殖率随着时间的延长而增加；G1 期细胞所占比例较对照组减少，S 期和 G2 期细胞比例较对照组增 β β β 加 （P ＜ 0.05 ）。感染 Ad-HBx 后，t-GSK3 在 mRNA 和蛋白水平上均无明显变化，而 p-GSK3 、 -catenin 以及 cyclin D1 蛋白的表达量增加 （P ＜ 0.05 ）。结论：HBx 可能通过促进人肝细胞株 L02 细胞中 GSK3β 的磷酸化，激 活 Wnt/β-catenin 下游信号通路，从而促进细胞的增殖。 [关键词]　肝肿瘤，实验性；肝炎病毒，乙型；糖原合成酶激酶3 ；细胞增殖；HBx 蛋白 [中图分类号]　R735.7 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431(2011)05-0406-06 β Effects of hepatitis B virus X protein on cell proliferation and GSK3 expression of human liver cell line L02 YU Yao1, 2 , WU Ting-ting1, 2 , JIANG Chong-liang1, 2 , JIAO Qing-fang1, 2 , FENG Tao1,