萝卜蛋白组分析中叶片蛋白质高效提取方法effective method of leaf .pdf

分子植物育种(网络版), 2012 年, 第10 卷, 第1559-1564 页 Fenzi Zhiwu Yuzhong (Online), 2012, Vol.10, 1559-1564 研究报告 A Letter 萝卜蛋白组分析中叶片蛋白质高效提取方法 相菲 , 徐良王 , 燕龚 , 义勤赖 , 德强 , 柳李旺 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室, 农业部华东地区园艺作物生物学与种质创制重点实验室, 南京农业大学园艺学院, 南京, 210095 通讯作者: nauliulw@ 作者 分子植物育种, 2012 年, 第10 卷, 第77 篇 doi: 10.5376/.2012.10.0077 收稿日期：2012 年06 月14 日 接受日期：2012 年07 月17 日 发表日期：2012 年12 月23 日 本文首次发表在《分子植物育种》(2012 年第10 卷第6 期756-760 页)上。现依据版权所有人授权的许可协议，采用 Creative Commons Attribution License 协议对其进行授权，再次发表与传播。只要对原作有恰当的引用, 版权所有人允许并同意第三方无条件的使用与传播。 引用格式(中文) ： 相菲等, 2012, 萝卜蛋白组分析中叶片蛋白质高效提取方法, 分子植物育种(online) Vol.10 No.77 pp. 1559-1564 (doi: 10.5376/.2012.10.0077) 引用格式(英文) ： Xiang et al., 2012, Effective Method of Leaf Protein Extraction for Proteomic Analysis in Radish, Fenzi Zhiwu Yuzhong (online) (Molecular Plant Breeding) Vol. 10 No.77 pp. 1559-1564 (doi: 10.5376/.2012.10.0077) 摘 要 以萝卜‘NAU-JLQX09 ’叶片为材料，分别采用Tris-HCl/TCA-丙酮沉淀法和改进的PEG 分级沉淀法提取蛋白质， 通过双向凝胶电泳技术比较两种方法的效果。结果表明，应用Tris-HCl/TCA-丙酮沉淀法提取的蛋白2-DE 图谱可识别出640 个蛋白点；而改进的PEG 分级沉降法的蛋白组分(F , F 以及F ) 2-DE 图谱可清晰识别蛋白点数目分别为537，170 与852， 1 2 3 总蛋白点数目多且高丰度蛋白RuBisCO 主要被沉降在F2 中，F3 中分离到更多的低丰度蛋白点。因此，在进行萝卜叶片蛋白 质组分析时，采用PEG 分级沉降法提取叶片蛋白，可获得较高质量的2-DE 凝胶图谱。研究结果为应用蛋白质组学解析萝 卜重要性状形成分子基础提供了良好的技术支持。 关键词 萝卜; 蛋白质提取; 蛋白质组学; 双向电泳 Effective Method of Leaf Protein Extraction for Proteomic Analysis in Radish Xiang Fei , Xu Liang , Wang Yan , Gong Yiqin , Lai Deqiang , Liu Liwang National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Key Laboratory of Horticultural Crop Biology and Genetic Improvement (East China), Ministry of Agriculture of P.R. China, College of Horticulture, Nanj