鼠李糖乳杆菌利用甘薯废渣发酵产乳酸的研究 - 中国农业科学.pdfVIP

中国农业科学 2016,49(9):1767-1777 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2016.09.013 鼠李糖乳杆菌利用甘薯废渣发酵产乳酸的研究 1,2 1 1 1 1 1 刘玉婷 ，吴明阳 ，靳艳玲 ，沈维亮 ，方 扬 ，赵 海 1 （中国科学院成都生物研究所/中国科学院环境与应用微生物重点实验室/环境微生物四川省重点实验室，成都 610041 ； 2 中国科学院大学，北京 100049） 摘要：【目的】研究鼠李糖乳杆菌发酵甘薯淀粉加工废渣生产乳酸的工艺条件，为薯渣的治理和利用提供新 的技术思路。【方法】使用元素分析仪对甘薯淀粉废渣中的主要元素进行分析测定，同时，在以菌体 OD 值法确定 的鼠李糖乳杆菌的生长对数期内分别取不同时间点设置 4 组乳酸发酵试验，以该菌利用葡萄糖液体培养基产乳酸 的发酵效率为考察指标确定该菌的乳酸发酵最适种龄。在此基础上，利用鼠李糖乳杆菌对甘薯废渣直接进行固体 发酵：采用单因素试验方法分别考察接种量、发酵温度、碳酸钙添加量，以及外加氮源对乳酸发酵效率的影响； 此外，考察外加氮源对发酵结束后薯渣固体发酵醪中的生物量的影响；结合正交试验设计，得到影响薯渣发酵产 乳酸因素的最优组合。【结果】元素分析结果显示甘薯淀粉废渣是一种高C、H含量的生物质，其干渣中C、H元素 质量百分含量分别达40.34%、6.16%，而N元素质量百分含量仅为0.32%，虽C元素含量丰富，但N元素相对匮乏， 需要外加氮源方可进一步促进其生长代谢。通过菌体OD 值法确定的鼠李糖乳杆菌的生长曲线显示，菌体接入2 h 后OD值迅速增长，菌体生长进入对数期。8 h后OD值基本不变，菌体进入稳定期。确定了种子的对数生长期在2 —8 h。在该时间区间内以4 h龄种子的乳酸发酵效率最高，达92.39%，对应残糖浓度最低，为0.59 g·L-1 ，确定 4 h是鼠李糖乳杆菌乳酸发酵的最适种龄。薯渣固体发酵中分批单因素试验结果依次为：接种量在10%时发酵效率 达最高，为83.87%；发酵温度在37℃时发酵效率最高，达85.55%；CaCO3 添加量在5%时发酵效率达最大值，为90.24%； 4种无机氮源中尿素组发酵效率达91.01%；尿素在0.8%添加量下发酵效率最大值为94.13%，同时发酵醪中活菌数 达4.32×108 cfu/g。依据以上单因素试验结果，CaCO 适宜添加量为5%，与中和发酵体系中初始糖（10%）产生的 3 乳酸所需的理论添加值相符，故以5%作为其固定添加量，不再列入正交试验的考察范围。此外，加入了纤维素酶 作为考察因素，确定正交试验因素与水平，开展四因素三水平的正交试验，最终确立了最适薯渣发酵条件：接种 量10%、尿素添加量0.8%、纤维素酶含量0.4%、发酵温度35℃、碳酸钙添加量5%，在该条件下发酵效率可达（96.55 8 ±0.866）%，发酵醪中活菌数达3.04×10 cfu/g。【结论】建立了低成本、简工艺、高效率的甘薯废渣发酵生产乳 酸工艺。该工艺不仅适于工业化生产乳酸，同时易于被广大甘薯淀粉加工农户利用。 关键词：鼠李糖乳杆菌；甘薯渣；发酵；乳酸 Lactic Acid Fermentation by Lactobacillus rhamnosus from Sweet Potato Residue