脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱的建立及分析 - citeseerx.pdfVIP

· １５０ · 中西医结合学报２００７ 年 ３月第 ５卷第 ２期 　 JournalofChineseIntegrativeMedicine， March ２００７；Vol．５，No．２ 脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱的建立及分析 １ １ ２ 刘萍 ，章怡祎 ，乔健 １．上海中医药大学龙华医院，上海 ２０００３２ ２．复旦大学华山医院神经病学研究所，上海 ２０００４０ 目的：建立脾肾虚型重症肌无力患者血清蛋白质双向电泳图谱，观察脾肾虚型重症肌无力患者与正常人血清 蛋白质差异表达情况。 方法：采用反复冻融法抽提血清蛋白质，以优化的双向电泳技术分离血清蛋白质，建立脾肾虚型重症肌无力 患者与正常人血清蛋白质双向电泳图谱，并采用二维电泳图谱专用软件对所得结果进行图谱分析。 采用基 质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法对两组间比较所得目标蛋白质点进行质谱鉴定。 结果：通过双向电泳，建立血清蛋白质双向电泳图谱，选取具有明显差异的蛋白点２１ 个进行质谱鉴定，共鉴 定出８ 种蛋白质。 结论：通过蛋白质组技术快速建立脾肾虚型重症肌无力患者血清蛋白表达图谱及质谱分析，可为进一步研究 其发病机制及治疗手段提供实验基础。 关键词：重症肌无力； 蛋白质组； 电泳； 乙酰胆碱受体 中图分类号：R７４６．１；文献标识码：A；文章编号：１６７２１９７７（２００７）０２０１５００５ Establishmentandanalysisofserumtwodimensionalgelelectrophoresis profilesofmyastheniagravispatientswithspleenandkidneydeficiency syndrome PingLIU ，YiyiZHANG ，JianQIAO１ １ ２ １．LonghuaHospital，ShanghaiUniversityof TraditionalChineseMedicine，Shanghai ２０００３２，China ２．NeurologyInstitute， HuashanHospital，FudanUniversity，Shanghai ２０００４０，China Objective：Thepurposeofthisstudywastoestablishtwodimensionalgelelectrophoresis （２DE） profilesof serumofmyastheniagravispatients， andtoidentifythedifferentialproteomicexpressionsbetweennormal personsandmyastheniagravispatientswithspleenandkidneydeficiency syndrome． Methods：Samplesofserumproteinwereextractedbyrepeatedfreezethawmethodandseparatedbytwo dimensionalelectrophoresis．Differentialproteomicexpressionsbetweenthemyastheniagravispatientsand thenormal control persons were identifiedby twodimensional polyacrylamidegel electrophoresis， silver staining，imagemaster ２DEsoftwareanalysis，peptidemassfingerprintingbasedonmatrixassistedlaser desorption／ionization time of flight mass spectrometry （MALDITOFMS），BioWorks and NCBI software databasesearching． Results：Thetwodimensionalpolyacrylamidegelelectrophoresisprofilesofserumproteinsweresuccessfully establishedby ２DE． Twentyone of the significant differential proteins were selected and identified by MALDITOFMS．Eightofthemwerefinallyidentifi