erβ1和erβ2在乳腺癌组织中的表达及其意义.docVIP

ERβ1和ERβ的表达 冯雯 倪震华 秦建民 梅怡 张计训 殷佩浩△ 作者单位：上海中医药大学附属普陀医院，上海 200062 通讯作者：△殷佩浩，Email:yinpeihao1975@ 【摘要】 目的：探讨乳腺癌组织中ERβ1和ERβWestern blot检测乳腺癌组织中ERβ1、ERβ2蛋白表达情况ERβ1表达明显低于癌旁（P=0.029）和正常组织中（P=0.029），ERβ1 mRNA在乳腺癌中的表达量比癌旁中减少（P=0.015）ERβ2 mRNA在乳腺癌中和癌旁中表达没有差异（P=0.865）ERβ1、ERβ2的mRNA水平与蛋白表达水平存在强相关性。 ERβ1，ERβ2，乳腺癌 The expression of ERβ1 and ERβ2 mRNA and protein in breasr cancer Wen Feng, Zhenhua Ni, Jianmin Qin, Yi Mei, Jixun Zhang, Peihao Yin，Putuo Hospital,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine 【Abstract】 Objective: To approach the expression of ERβ1, ERβ2 mRNA and protein in breast cancer and its clinical significance. Method: The Western blot analysis of ERβ1, ERβ2 and protein expression was carried out in breast cancer tissue, adjacent tissue and normal tissue. Fluorescence quantitative PCR was applied in ERβ1, β2 mRNA expression. Results: The expression of ERβ1 in mammary cancer is significantly lower than in adjacent (P = 0.029) and in normal tissues (P = 0.029), ERβ1 mRNA expression in breast cancer compared with in adjacent tissues (P = 0.015), ERβ2 mRNA in breast cancer exists no difference compared with the adjacent expression (P = 0.865). Conclusion: There is strong correlation between ERβ1 and ERβ2 mRNA level and protein level and ERβ1 in judging the prognosis of mammary cancer have a certain significance. 【Key words】 ERβ1，ERβ2，breast cancer 乳腺癌是激素依赖性肿瘤。以往的研究多集中在雌激素和雌激素受体α（ERα）与乳腺癌的发生、发展。罕有雌激素受体β（ERβ）与乳腺癌临床相关性的报道。本研究探讨乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织中野生型ERβ1和ERβ剪接变异体ERβ2蛋白和基因的表达进行检测，旨在探讨它们的表达与乳腺癌的生物学行为的关系。 1．临床资料 取2007年8月2008年9月30例癌旁组织和30例正常乳腺组织。术前未接受化疗和其他药物治疗，术后均经病理。39～7岁浸润性癌23例，导管内癌伴微浸润6例，髓样癌1例；TNM分期I期7例，期21例，期2例。所有组织选取后立即冻入液氮中保存。 2.1 试剂：全长野生型ERβ1鼠抗人单克隆抗体（德国Acris公司），克隆号PPG5/101：50稀释ERβ2抗体德国Acris公司 2.2 主要仪器：Mastercycler ep银质梯度PCR仪、Biophotometer生物分光光度计、5804R高速冷冻离心机（德国Eppendorf公司）； ABI7300实时定量PCR仪（美国ABI公司）；SDS垂直电泳槽及Western-Blot转印设备（美国Bio-Rad公司）。 3．方法 3.1 蛋白质抽提：每组组织分别加入预冷的含抑制剂的蛋白质抽提试剂（250mg组织中加入1ml抽提试剂），匀浆器每次30秒低速匀浆，至组织完全裂解，裂解液于预冷的离心机中14，000 *g离心15分钟。上清液立刻转移入新的离心管中