拮抗长枝木霉t115d菌株发酵条件 - 江苏农业科学.pdfVIP

江苏农业科学　２０１３年第４１卷第１０期 — ３３３— 台莲梅，高俊峰，张亚玲，等．拮抗长枝木霉Ｔ１１５Ｄ菌株发酵条件［Ｊ］．江苏农业科学，２０１３，４１（１０）：３３３－３３４． 拮抗长枝木霉 Ｔ１１５Ｄ菌株发酵条件 １ ２ １ １ 台莲梅 ，高俊峰 ，张亚玲 ，靳学慧 （１．黑龙江八一农垦大学农学院，黑龙江大庆 １６３３１９；２．中化作物保护品有限公司，黑龙江哈尔滨 １５００００） 　　摘要：对拮抗长枝木霉（Ｔ．ｌｏｎｇｉｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）Ｔ１１５Ｄ菌株发酵条件进行研究。结果表明，以ＰＤ作为培养液，适宜木 霉菌Ｔ１１５Ｄ产生孢子的ｐＨ值是７．０～８．０，温度是３０℃，转速为２００～２５０ｒ／ｍｉｎ；适宜菌丝生长的ｐＨ值是４．０～６．０， 温度是２５～３０℃，转速为１５０～２５０ｒ／ｍｉｎ。适宜木霉菌Ｔ１１５Ｄ发酵的碳源是甘露糖，氮源是酒石酸铵。 　　关键词：长枝木霉；Ｔ１１５Ｄ菌株；发酵 　　中图分类号：ＴＱ９２９　　文献标志码：Ａ　　文章编号：１００２－１３０２（２０１３）１０－０３３３－０２ 　　木霉菌（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｓｐｐ．）分布广泛，对多种植物病原真 木糖、果糖、麦芽糖、乳糖、山梨糖、半乳糖等９种碳源配制成 菌有拮抗作用，具有适应性强、抗菌谱广等优点，还能促进植 不同碳源的培养液。 ［１－２］ 物生长，在防治土传病害中起着重要作用 。庄敬华等研 １．５　不同氮源对木霉菌Ｔ１１５Ｄ生长的影响 ［３］ 究表明，可以通过控制培养条件来生产不同类型的孢子 。 选择ＧＰＦ为基础培养液，分别用蛋白胨、酵母膏、半胱氨 马铃薯葡萄糖培养液与蔗糖培养液可作为生产厚垣孢子的培 酸、硫酸铵、天冬酸、丙氨酸、硝酸钾、氯化铵、谷氨酸、硝酸铵 养基。木霉的孢子类型和产孢速度受温度影响，在适于木霉 等１０种氮源配制成不同氮源的培养液。 生长的温度范围内，２８℃以上形成分生孢子，３０℃时产孢量 １．６　不同ｐＨ值对木霉菌Ｔ１１５Ｄ生长的影响 最大，初始ｐＨ值低易产生厚垣孢子，ｐＨ值高易产生分生孢 用１ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ和１ｍｏｌ／ＬＨＣｌ调节 ＰＤ培养液的ｐＨ 子。不同木霉菌发酵条件有一定差异。钩状木霉Ｔｈｌ２菌株 值，将ｐＨ值设为７个梯度。 在以葡萄糖为碳源、蛋白胨为氮源、发酵温度为２５℃、初始 １．７　不同温度对木霉菌Ｔ１１５Ｄ生长的影响 ｐＨ值为６、装瓶量为５０ｍＬ、摇床转速为１８０ｒ／ｍｉｎ的培养液 将温度设为２０、２５、３０、３５℃４个处理，用 ＰＤ培养液培 ［４］ 中培养３ｄ，最有利于菌丝体生长 。优化后的拟康氏木霉 养木霉菌Ｔ１１５Ｄ。 ［５］ 发酵培养基初始ｐＨ值为６．０～７．０，发酵温度为２８℃ 。笔 １．８　不同摇床转速对木霉菌Ｔ１１５Ｄ生长的影响 者对土壤中分离和筛选得到的优势拮抗长枝木霉（Ｔ．ｌｏｎｇｉ 将摇床转速设为０（静止）、１５０、２００、２５０ｒ／ｍｉｎ４个处理， ｂｒａｃｈｉａｔｕｍ）Ｔ１１５Ｄ菌株的液体发酵条件进行了研究，旨在为 用ＰＤ培养液培养木霉菌Ｔ１１５Ｄ。 开发利用木霉菌提供依据。 １．９　测定方法 用移液器吸取少许上述Ｔ１１５Ｄ发酵液，滴入血球计数板 １　材料与方法 中，显微镜下计数孢子数并