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维普资讯 第 24卷 第 2期 应 用 化 学 Vo1．24No．2 2007年2月 CHINESEJOURNALOFAPPLIEDCHEMISTRY Feb．20o7 电化学石英晶体阻抗和 FTIR．ATR研究 牛血清 白蛋白在羟基磷灰石 、TiO2表面的吸附 杨 琴 刘美玲 张友玉 谢青季 姚守拙 (湖南师范大学化学化工学院，化学生物学及中药分析省部共建教育部重点实验室 长沙 410081) 摘 要 用电化学石英晶体阻抗法 (EQCI)和衰减全反射红外光谱法 (F11R-ATR)研究了牛血清 白蛋 白 (BSA)在纳米生物活性材料 TiO，和羟基磷灰石(HAP)上的吸附行为，获得了BSA吸附过程中电极表面的质 量变化和电极／蛋白质界面双电层中电容变化以及BSA构象变化等信息。以2步骤连串反应机理分析 BSA 吸附动力学。结果表明，BSA在2种电极表面的吸附过程均分为吸附和重排2个过程，BSA在TiO上吸附速 度慢于在HAP上的吸附．且难达到稳定状态。根据Sauerbrey方程结合Martin方程估算了BSA在TiO和HAP 上饱和吸附时的表面质量覆盖度，分别为 1．12×10 和 1．09×10 g／cm 。红外谱图结果还表明，生物材料 的表面组成对蛋白质吸附动力学和蛋白质结构变化均有影响。BSA在HAP 表面吸附时的响应更大，并对蛋 白质二级结构的变化影响更大。 关键词 牛血清 白蛋白，电化学石英晶体阻抗 ，衰减全反射红外光谱法，TiO，羟基磷灰石 ，吸附动力学 中图分类号：O614 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2007)02-0128-06 医疗上常用移植生物活性材料来取代坏死或受损硬组织。生物材料植入体内，材料表面直接与活 体组织接触，其生物相容性很大程度决定于材料的表面特性 。在材料表面吸附的蛋 白质可以调节组织 细胞对外来植人体的生理反应_1]。有现象表明吸附在生物材料界面上的蛋 白质数量以及构象决定了吸 附细胞的种类，并进一步影响细胞的活性及其扩散和迁移 2【]。紫外光谱 3【]、红外光谱 4【]、x射线光电子 能谱 5【]、椭圆偏振光谱[和圆二色光谱[、表面等离子体波共振 8【]及高效液相色谱 9【都可应用于蛋 白 质的研究。但存在如灵敏度不很高或难 以获得实时信息等不足。电化学阻抗研究蛋 白质已有文献报 道 l【。。。然而，很少有文献报道用 电化学压 电石英晶体阻抗系统研究蛋 白质在不同生物活性材料包括 HAP和TiO，表面上的吸附过程。 本文应用电化学压电石英晶体阻抗(EQCI)能实时、灵敏监测电极表面过程、提供电极表面质量变 化和体系物理化学性质变化信息以及 FYIR．ATR能分析物质表层成分结构信息的特点，比较研究了 BSA在 HAP、TiO，2种纳米生物材料表面的吸附动力学和吸附机理，考察其吸附过程中的构象变化。 1 实验部分 1．1 试剂和仪器 BSA(美 国Amresco公司)，纳米 TiO，(粒度为 5 15nm，日本恒和化学公司)，纳米 HAP按文献 [11]方法 自制。其它试剂均为分析纯或优级纯。BSA储备液用pH=7．4的0．05m0l／，LPBS配制，于冰 箱内保存。水为二次蒸馏水。 Nexus670型傅立叶变换红外光谱仪 (NicoletInstrumentCo．，Madison，WI)，配以衰减全反射附件 (ATR，45。入射角，ZnSe晶片)；氘代硫酸三甘肽(DTGS)检测器；OMNIC5．1数据处理软件，谱峰拟合使 用 GRAMS／AI软件 (GalacticIndustry，Inc．，Salem，NH)；S-570型扫描电子显微镜(日本 日立)。 1．2 电化学石英晶体阻抗测试 本文采用文献 [10]测试装置。实验用直径为 l2．5mm双面镀金的 AT切 9MHz压 电石英晶体 2006-03-21收稿 ，2006-06-30修 回 国家 自然科学基金20675030)、重大基础研究前期研究专项 (2003CCC00700)和湖南省教育厅重点项 目资助 通讯联系人：张友玉，女