第十讲茎尖分生组织培养.PDF

第十讲茎尖分生组织培养 2012年秋季 上节课内容回顾 1 ）什么是体细胞无性系变异，其遗传基础包括哪 些？ 体细胞无性系变异：植物外植体经组织、细胞培养的脱分化 和再分化过程后，再生植株中产生的异于亲本的变异 遗传基础包括：染色体变异，基因突变，DNA扩增，转座子 激活，表观遗传学水平变化及细胞质基因组的改变等 2 ）体细胞无性系变异的普遍性是指？ 变异具有自发性 细胞、愈伤组织到再生植株都可能出现变异 物种、器官、组织都可以出现变异 变异引发的性状具有普遍性 3 ）影响体细胞无性系变异的因素有哪些？ 基因型 外植体 培养基 继代培养时间 温度 组织原有倍数性 4 ）什么叫诱变？常用的诱变方法有？ 诱变（Mutagenesis ）：指用物理、化学因素诱导植物的遗传 特性发生变异的方法。细胞组织培养中施加诱变处理，可以 大大增加体细胞无性系变异的频率 常用的方法有：物理诱变，化学诱变，空间技术诱变及复合 诱变 5 ）变异体细胞筛选的方法有哪两类？诱导及筛选程 序包括哪些过程？ 方法分为直接筛选及间接筛选 程序包括：外植体的获得—愈伤组织的诱导—继代获得松散 型愈伤组织—建立细胞悬浮系—诱变-- （变异体细胞筛选）-- 细胞培养—愈伤组织—诱导分化获得再生植株—性状分析及 遗传鉴定 6 ）体细胞无性系变异的应用有哪些方面？ 为体细胞杂交提供选择性标记 基因功能研究 作物遗传改良 本讲主要内容： 茎尖分生组织培养的基本概念 目的及应用 方法 脱毒苗的培育和病毒检测 一：基本概念 茎尖分生组织培养 切取茎的先端包括茎尖分 生组织部分，进行无菌培 养，使其发育成为完整植 株的过程 取材： 植物顶端的原分生组织和衍生的初生分生组织的培养。 小到10 －100 μm 的茎尖分生组织，大到几十毫米的茎尖 或更大的芽。茎尖培养的成活率与茎尖大小呈正相关并 与培养目的有关。 茎尖培养广泛应用于种苗快速繁殖，脱毒苗的生产，品 种改良和基础理论研究。快繁可取数毫米大小，脱病毒 培养要求取小于1mm的茎尖。 植物茎尖培养过程 二：茎尖分生组织培养的目的及应用 基础理论研究 形态建成研究 脱毒植株生产 实际生产应用 营养繁殖 经济苗木的育种 1 形态建成研究 茎尖分生组织取材便利，培养条件可以严格控制，可以排除其 它部位及一些不利因素的影响 茎尖部分是分化组织区，是产生地上及地下部分的全能性区域 调节培养基中的细胞分裂素浓度，诱导产生芽，也可以调节顶 端优势，使叶腋内芽原基陆续形成小芽，小芽发育形成丛生 芽。该过程可以作为研究茎、根系及芽的形态建成的体系 通过该途径，可以发现合适的快繁的时期 1952年，Morel发现兰花茎尖可以培养形成原球茎状的扁平小球 体，可以不断切割形成无性繁殖系 2 脱毒植株的生产 植物病毒已发现的超过500余种，严重影响农业生产，特别是以 无性繁殖为主的农作物及经济植物等 病毒引起的病害不同于真菌及细菌病害，不能采用杀菌剂和抗 生素防治，生产上目前无法根治 1952年，Morel和Martin发现，通过茎尖组织培养，可以从感病 的大丽花中获得无病毒植株 目前，植物脱毒应用极为广泛，如马铃薯及草莓等 3 营养繁殖 茎尖组织培养可以严格控制营养、激素成分及浓度、温度及光 照等培养条件，是常规下无法生长和繁殖的植物材料顺利扩繁 1960年，Morel最早以兰花茎尖繁育兰花，克服了种子繁殖效