人抗酿酒酵母抗体(asca)elisa 试剂盒使用说.pdfVIP

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA 试剂盒使用说 明书 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 试剂盒名称】 人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 试剂盒用途】 定量人血清、血浆及相关液体样本中抗酿酒酵母抗体(ASCA)的含量 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法 （ELISA）。将标准品、待测 样本加入到预先包被抗酿酒酵母抗体(ASCA)透明酶标包被板中，温育足够时间 后，洗涤除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未 结合的成分。依次加入底物A、B，底物 （TMB）在辣根过氧化物酶 （HRP）催 化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色，颜色的深浅与样品中抗酿酒酵母 抗体(ASCA)浓度呈正相关，450nm 波长下测定OD 值，根据标准品和样品的OD 值，计算样本中抗酿酒酵母抗体(ASCA)含量。 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒 试剂盒组成】 1 酶标包被板 12 孔×8条 7 底物夜A 6mL 2 标准品：200ng/ml 0.6mL 8 底物夜B 6mL 3 20 倍浓缩洗涤 20mL 9 终止液 6mL 液 4 标准品稀释液 6mL 10 说明书 1份 5 样本稀释液 6mL 11 封板膜 1张 6 酶标试剂 6mL 12 密封袋 1个 备注：标准品用标准品稀释液依次稀释为：200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸 【人抗酿酒酵母抗体(ASCA)ELISA试剂盒操作步骤】 1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30 分钟。 2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设 置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准 品50μL；待测样本孔中先加入待测样本 10μL，再加样本稀释液40μL （即样本 稀释5倍）；空白对照孔不加。 4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤 液，吸水纸上拍干，如此重复洗板4 次 （也可用洗板机按说明书操作洗板）。 6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。 7 4 、温育：重复 的操作。 8、洗板：重复5 的操作。 9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B 液 50μL，37℃避 光显色15min。 10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应 （颜色由蓝色立转黄 色）。 15 450nm 11、测定：以空白孔调零，在终止后 分钟内，用 波长测量各孔的吸 光值 （OD 值）。 12、计算：根据标准品的浓度及对应的OD值，计算出标准曲线的直线回归方 程，再根据样本的OD值，在回归方程上计算出对应的样品浓度，也可以使用各 种应用软件来计算。最终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。 【人抗酿酒酵母抗体(A