柠檬苦素的色谱研究进展.docVIP

柠檬苦素的色谱检测方法研究进展 摘要：赣南脐橙主要以鲜食为主，脐橙加工业落后，其主要原因为脐橙等柑橘类汁具严重的后苦作用，影响产品风味。其中柠檬苦素为加工中主要苦味来源。本文就柠檬苦素的色谱检测方法作简要的概述，旨在为脐橙的深加工中控制产品的质量提供一些参考。 关键词：脐橙；柠檬苦素；检测；色谱 前言 赣南是我国著名的脐橙生产基地，素有“中国脐橙之乡”之称。赣南脐橙年产量已经突破150万吨，但目前国内对脐橙的开发利用率较低，95％以上产品仍90%以上，上市集中，常常出现“丰产不丰收”，脐橙滞销，果农“卖果难”等问题。解决赣南脐橙滞销问题，最可行的办法就是大力发展脐橙深加工，而脐橙原料在深加工过程中变苦，是困扰脐橙果酒生产的难题。脐橙鲜食或其鲜榨果汁并无苦味，但压榨的橙汁在室温中存放几个小时或在冰箱中冷藏过夜，会变苦。这种脐橙果汁中的延迟苦味源于无苦味的前体物生成了柠檬苦素。据报道，脐橙等柑橘类汁出现延迟苦味的原因主要是在酸性、加热、冰冻或机械损伤等逆境环境条件下，果实中所存在的非苦味的柠檬苦素A环内酯转变成了具有强烈苦味的柠檬苦素[1]。脐橙苦味主要来自柠檬苦素类 (limonin)的。 随着仪器分析技术的广泛应用和检测技术的发展，研究者建立了多种检测柠檬苦素类似物的方法，主要有分光光度法、薄层色谱法(TLC)、高效液相色谱法(HPLC)等。 1.薄层层析法 薄层色谱法的优点是简便快捷，缺点是由于是目测，结果误差较大，所以分析重现性一直束缚着其的发展。Dreyer 在最初的柠檬苦素检测方面做核磁共振技术（NMR）对柠檬苦素Hasegawa 和 Bennett 利用这两种方法分离、鉴定 30 种柠檬苦素苷 20 种柠檬苦素配糖体。Fisher创建[6]。 Soleiman 等人利用 HPLC 技术，对伊朗马赞德兰省柑橘果汁中柠檬苦素进行 18.5±3.6ppm[7]。Amit Vikram 等人利用 C18 反向柱、二元溶剂梯度体系、二 7 种柠檬苦素苷配基和柠檬苦Shaojie Li和Zhuang Wang采用HPLC检测温州蜜柑中三类主要苦味物质——柠檬苦素、诺米林、柚皮苷在生长过程中含量的变化，测定柠檬苦素和诺米林时，以二氯甲烷萃取，使用 C18色谱柱Manners等的方法，使用流动相配比为乙腈：10%甲醇=40:60，以 1ml/min的速度等度洗脱，210nm波长下检测；检测柚皮苷时，以纯乙腈为流动相A，10%的乙腈为流动相B，参照Ribeiro等人的洗脱方法，在285 nm波长下检测。结果表明，柠檬苦素、诺米林、柚皮苷分离效果好，检测精确度高[9]。刘亮，戚向阳等人利用 HPLC 技术对国产红葡萄柚、锦橙、酸橙和脐橙进行 C18 反向柱，45%乙腈 210nm。样品的回收率、精密度和重现性都比较好 3.超高效液相 超高效液相色谱(UPLC)是分离科学中的一个全新类别，UPLC借助于HPLC的理论及原理，涵盖了小颗粒填料、非常低系统体积及快速检测手段等全新技术，增加了分析的通量、灵敏度及色谱峰容量。Manners和 Hasegawa提出的HPLC-MS法，并使用微球硅胶柱和环己烷、四氢呋喃的二元体系分离柠檬苦素类似物甙元，该方法的高选择性已经达到商业标准[15]。Gary 等人分别利用高效液相-电子轰击电离-质谱联用法（HPLC-EI/MS）和-常压化学电离-质谱联用法（HPLC-APCI/MS），对 17 种已知的中性柑 HPLC-MS 数据提分离效率高，选择性好，检测灵敏度高，操作自动化，应用范围广Maier, V. P., Beverly, G. D.Citrus Limonin Research[J]. Food Sci, 1968, 33:488-492. [2] Dreyer, D. L.Citrus bitter principles—II : Application of NMR to structural and stereochemical problems[J]. Tetrahedron, 1965. 21: 75-87. [3] Hasegawa S, Bennett R.D., Herman Z,et al. Limonoid glucosides in Citrusf[J].Phytochemistry, 1989, 28(6): 1717-1720. [4] 孙崇德,陈昆松,陈青俊;等. 柑桔果实中天然柠檬苦素和诺米林的提取、鉴别与检测[J]. 中国食品学报,2004,04(1):6~10. [5] 赵雪梅,叶兴乾,席屿芳;等. 胡柚皮有效成分的分离鉴定及其药理活性[J]. 果树学报, 2006,23(3):458～461. [6] Fisher J. F. Quantitative de