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血液科标本保存血液标本采集和保存标准流程一、目的血液是容易得到的生物资源,可能是正常病人唯一可得到的资源。标本库主要贮存血清、血浆和白细胞层。标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。二、权限1.只采集签写知情同意书的患者,并确定采集的时间2.血液只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,血液只能由受过培训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行3. 在采集到供者血液的30分钟内处理血液标本4. 在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统三、使用范围标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。四、材料和设备血液采集盒包括:医用(5ml和10ml)一次性注射器、一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、污物桶、笔、试管架。通风橱-80°C冰箱离心机移液器灭菌枪头冻存管存放冻存管的48孔板2个聚苯乙烯架Smartscan Solo 2D 读码器线性条码扫描仪计算机五、具体步骤1. 血液科病房的管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。2 确定采血时间,将知情同意书交给标本库。3 患者在采血前8-12小时之内没有进食或酒精或咖啡因4 护士采血前口头肯定病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。5 通知标本库的人员来去血标本,以确保30分钟内处理标本6 利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。采血盒内包含2个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管,2个无EDTA的红帽管,将管按1-4进行标记如下:2%EDTA抗凝剂的紫帽管2%EDTA抗凝剂的紫帽管无EDTA的红帽管无EDTA的红帽管7. 检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库8. 将采血管按照数字顺序1-4,收集20ml血液。9. 将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写血液标本采集表格。10. 将采血管在采集的30分钟内送回标本库。11 入库前确保血液标本在4C冰箱保存12 标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本13 将10个蓝色,10个黄色和10个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。14. 登记血液的采集时间和处理开始的时间15. 将2个红帽管和2个紫帽管放在离心机上,配平,离心1500g ,10分钟。16.小心将管移出,避免干扰白细胞层,将管放在聚苯乙烯架子上,准备提取以下标本。17. 血清的提取17.1血清来自3号和4号红帽管,用无菌的移液枪将3号管中的血清移出,并将1毫升的分液分入有蓝盖的冻寸管中,重复进行4号管。17.2将血清按照100微升进行分装18. 血浆的提取18.1血浆,血细胞层和红细胞来源于EDTA管,用无菌移液管将血浆从1管中移出,小心别碰到血细胞层。18.2将血浆就按照100微升进行分装,放入4个黄盖的冻存管中。19.有核细胞层19.1用无菌移液管将有核细胞层缓慢移出,用转圈的动作将可见的有核细胞层移出,因为有核细胞层粘附于红细胞层,一些红细胞和血浆将和有核细胞一起被吸出。19.2将有核细胞层在10个带白帽的冻存管中平均分配20 将冻存管放在48孔板上,放入-80C冰箱中保存,填写血液标本采集处理登记表附件3 血液标本采集记录参考文献Tuck MK, Chan DW, Chia D, Godwin AK, Grizzle WE, Krueger KE, Rom W, Sanda M, Sorbara L, Stass S, Wang W, Brenner DE. Standard Operating Procedures for Serum and Plasma Collection: Early Detection Research Network Consensus Statement Standard Operating Procedure Integration Working Group. J Proteome Res. 8(1):113-117, 2009.Grizzle WE, Bell WC, Sexton. Issues in Collecting, Processing and Storing Human Tissues and Associated Information to Support Biomedical Research.In: Translational Laboratory of Early Cancer (Eds. Grizzle, Sirvastava). In press, 2009.Caporaso N, Vaught J. Collection, processing, and analysis
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