与Pi-2(t)基因连锁的栽培稻BAC克隆在药用野生稻和栽培稻中的比较物理定位.pdfVIP

第47卷第4期 武投大学学报(理学版) VoJ．47No．4 2001年8月 J．WuhanUniv．(Nat．Sci．Ed．) A“￡．2001，503～507 文章编号：0253—9888(2001)04一q503—05 与Pi一2(f)基因连锁的栽培稻BAC克隆在药 用野生稻和栽培稻中的比较物理定位 李 霞，李宗芸，罩 瑞，何光存，宋运淳1 (武汉大学植物发育生物学教育部重点实验室，湖北武汉430072) 摘要：用栽培稻遗传图第6连锁群中与Pi2(z)紧密连锁的RFLP标记RG64及其筛选出来的BAC克隆 于药用野生稻和栽培稻第6染色体．药用野生稻杂交信号的百分距离分别为4487±5．33和46．50--4-_457，而栽 培稻则为35．85士3．06和3605±2．44，信号检出率相应地为7．14蟛、42．53％、8．09％和40．78％．BAC克隆和 RFLP探针杂交位置几乎一致，由此推知，与抗性基因Pi一2(0连锁的BAC克隆在药用野生稻中的同源顺序就在第 6染色体杂交信号出现的相应位置．在未封阻的情况下，药用野生稻多个染色体上具有信号，这表明它和栽培稻的 Cot-I DNA重复序列在一定的程度上具有同源性，文中讨论丁栽培稻BAC克隆对药用野生稻原位杂交物理作蹦 的可行性和Cot—IDNA的制各所涉及的一些技术问题 关键词：药用野生稻i细菌人工染色体一荧光原位杂交i比较物理定位iPi一2(#) 中圉分类号：Q343．22 文献标识码：A 水稻不仅是世界上主要粮食作物，也是禾本科 枯病和东格鲁病毒等多种病虫害的特性，是稻属植 植物基因组研究的模式植物之一[1。]．对它和其它 物抗性研究的一种理想材料““． 禾本科植物的比较研究除了具有重要的农业生产实 本研究中．根据Jena(1994)“”的栽培稻与药 践意义外，更重要的是将为我们揭示禾本科植物基 用野生稻的分子比较遗传图，选用与抗稻瘟病基因 因组结构的共同特点和起源与进化规律提供信息， 为建立禾本科遗传大体系积累资料“。]．野生稻更 出的栽培稻BAC克隆38D17c”。“作为探针，对药用 是水稻种质资源中重要的部分，在漫长的进化过程 野生稻进行了荧光原位杂交(FISH)，确定r一一 中，由于复杂的地理环境和各种生态因素的作用，形 2(f)基因的连锁标记在药用野生稻染色体上的具体 成了极其丰富的遗传多样性．目前，从野生稻中已 位置及分析了药用野生稻第6染色体的核型． 发掘了抗病、抗虫、耐冷、耐热、细胞质雄性不育等许 迄今为止，只有仓鼠、人类、家鼠3种动物具有 多与产量性状密切相关的优良基因，因此对野生稻 商品化的Cot—IDNA(仅仅富含高度和中度DNA 资源的研究正日益受到重视口J．我国共有3种野生 重复序列，不含有单及低拷序列)．绝大多数动物以 及所有的植物的Cot—IDNA只能由研究人员自己 稻，即普通野生稻(OryzaRuffipogon．Griff)、庞粒 ArtificialChromo— 制备o“．随着BAC(Bacterial 野生稻(0．meyerana．Baill)和药用野生稻(0．off,c— and Artificial inalis．WallWatt)．其中药用野生稻主要分布somes)、YAC(YeastChromosomes)、 ArtificiM PAC(P1一derivedChromosomes)等大片 在广东、广西、海南、云南4省(区)的38个县(市)