茶藨子叶状层菌的深层发酵和其菌丝质量标准研究.pdf

提 要 目的：对茶藨子叶状层菌的液体深层发酵工艺及其发酵菌丝的质量控制进行了系 统研究，为茶藨子叶状层菌液体发酵的工业化生产和后续开发利用及质量标准的制定 提供实验资料和科学依据。 方法：1.采用组织分离方法获得茶藨子叶状层菌的纯菌株，通过单因素实验确定 该菌的最佳培养基组成和深层发酵培养的最适条件，通过发酵罐生产实验确定了工业 生产的发酵周期和生产出了供以后实验研究用菌丝。2. 在药材质量控制方面，对菌 丝和粉末进行了显微鉴别，对菌丝进行了理化和薄层色谱鉴别；依据《中国药典》（2010 版）关于中药材质量标准的有关规定，对茶藨子叶状层菌菌丝的水分、总灰分和酸不 溶性灰分进行检查，测定了水溶性和醇溶性浸出物的含量；用氨基酸分析仪测定氨基 酸的含量，RP-HPLC 测定菌丝中游离麦角甾醇的含量，硫酸-苯酚法测定菌丝多糖的 含量。 结果：1．分离获得了茶藨子叶状层菌的纯菌株，确定了摇瓶发酵最佳培养基组 成为：麸皮 4% ，蛋白胨 0.2%，葡萄糖 2.5% ，磷酸二氢钾 0.05%，硫酸镁 0.025% ； 摇瓶发酵最适发酵条件为：温度 29 ℃，装液量 80ml⁄ 250ml 三角瓶，摇瓶转速 150rpm， 初始 pH 自然，培养7d ；5 吨发酵罐发酵条件：装量 3000L，接种量 10%，温度29±1 ℃，搅拌转速 160rpm，通气量 80m3/h ，初始pH6.0~6.5 ，培养4d 。2.根据质量控制实 验结果，初步制定了茶藨子叶状层菌菌丝的质量标准草案，其中水分含量不得过 12.0%，总灰分含量不得过 6.0%，酸不溶性灰分含量不得过 0.50 % ；水溶性浸出物含 量（热浸法）不得少于 25.0% ，醇溶性浸出物含量不得少于 15.0%；氨基酸总量不得 少于 30.0 % 。麦角甾醇含量不得少于0.10 %，多糖含量不得少于 5.0% 。 关键词 茶藨子叶状层菌; 深层发酵; 菌丝质量标准 Studies on the submerged fermentation and quality standard of Phylloporia ribis Speciality: Pharmacogosy Author: Qin Guopei Tutor: Professor Xu Lingchuan Abstract Objective:This paper studied the submerged fermentation process and quality control of Phylloporia ribis, and provided experimental data and scientific evidence for establishing the quality standards.It also was helpful to the further industrialized production and use of Phylloporia ribis . Methods:1.The pure hypha of Phylloporia ribis was isolated using organization separation method. The best medium and optimum condition of submerged fermentation were determined in the method of single factor experiment. Fermentation period in commercial production was confirmed by production with the fermenter.And we got hypha which can be used for the further experiment.2. In the field of q