补肾活血针法治疗冠心病心绞痛和其动员骨髓EPCs、修复内皮功能的研究.pdfVIP

摘 要 本课题在回顾冠心病中医学理论的基础上，从“心本于肾”理论出发，结合导师 治疗冠心病的临床经验，建立补肾活血针法，意在强调肾虚血瘀在冠心病发病中的重 要性，并对其治疗冠心病心绞痛的疗效和安全性进行了较系统的临床观察。同时，制 作大鼠心肌缺血模型，培养骨髓细胞和外周血细胞，运用流式细胞仪、免疫荧光术、 免疫印迹技术等，证实了补肾活血针法具有动员骨髓 EPCs、修复内皮的作用，为临 床针灸治疗冠心病心绞痛提供一种新的组穴思路。本研究分为临床研究和实验研究两 部分，主要研究方法和结果如下： 临床研究 目的 观察补肾活血针法治疗冠心病心绞痛的临床疗效。 方法 选择冠心病稳定型劳累性心绞痛患者60例，随机单盲分为两组，试验组 和对照组各30例，治疗组采用自拟补肾活血针法，针刺肾俞、膈俞、心俞穴为主穴； 对照组选用内关穴为主穴。每日一次，治疗4周。 结果 试验组和对照组心绞痛总有效率分别为90.00%、63.33%；肾虚血瘀、心 脉痹阻证治疗前后积分，试验组总有效率为86.67%，对照组总有效率为60%，其差异 有显著性(P0.05)； 治疗前后中医症状积分，试验组治疗后中医症状积分明显降低， 且降低幅度显著大于对照组（P0.01）。硝酸甘油停减率，试验组减停率93.33%，对 照组减停率 80.00%，两组比较差异有显著性(P0.05)。心电图疗效，试验组和对照 组总有效率分别为73.33%、50.00%，两组比较差异有显著性(P0.05)。 结论 补肾活血针法能够明显缓解心绞痛、消除主要临床症状、减少硝酸甘油 用量、改善心电图，是治疗冠心病心绞痛较好的方法之一。 关键词 心绞痛；补肾活血针法；硝酸甘油停减率；心电图；内关 实验研究 目的 探讨补肾活血针法动员骨髓EPCs、修复内皮的作用及其机制。 方法 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制大鼠心肌梗死模型，随机分为模型 组（M 组）、观察组（补肾活血针法组）（G 组）、对照组（内关组）（D 组），另 10 只 正常大鼠作为空白组（K组），共 4组。4周后取各组大鼠骨髓及外周血进行EPC的分 离培养，培养7天后收集贴壁细胞，运用流式细胞仪进行EPC表型鉴定，免疫印迹法 （Western blotting）检测骨髓基质金属蛋白酶 9（MMP-9）的表达情况，另外采用 酶联免疫吸附法（ELISA）、硝酸还原酶法、比色法等技术检测上清液血管内皮生长 因子（VEGF）、基质细胞衍生因子 1-a（SDF-1a）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化 酶（SOD）的变化。 结果 1.EPC 表型鉴定：骨髓 CD34+/CD133+阳性率，观察组（60.4 士 5.6%）较模型组 （20.5 士 5.7%）有非常显著提高（P0.01），且明显高于对照组（28.1 士 3.4%） （P0.05）；外周血CD34+/CD133+阳性率，观察组（9.5士2.1%）明显高于其他三组 （2.3 士 1.1%、1.4 士 0.4%、0.8 士 0.1），差异非常显著（P0.01）。对照组、模型 组与空白组三者两两比较，无显著性差异（P0.05）。 2.骨髓内皮祖细胞MMP-9免疫印迹条带分析表明，观察组骨髓内皮祖细胞MMP-9 产生的量较模型组显著增加，且高于对照组（P0.01）；模型组与空白组相比差异无 显著性（P0.05）。 3.外周血EPC上清液VEGF、SDF-1a检测结果显示，观察组与对照组均能提高VEGF、 SDF-1a含量，且观察组高于对照组，差异有显著性（P0.01）；模型组较空白组无显 著性差异（P0.05）。 4. 外周血EPC上清液NO、SOD检测结果显示，观察组NO及SOD水平明显增高，差异 有显著性（P0.05），模型组却升显著降低，对照组与模型组及空白组比较，无显著 性差异（P0.05）。 结论 补肾活血针法能够动员骨髓EPC，经外周血到达受损部位而修复内皮，发 挥“自身移植”的作用。其机制可能与缺血心肌中VEGF、SDF-1a表达上调,激活MMP-9 信号通路有关。 关键词 AMI模型大鼠；EPC；补肾活血针法；MMP-9；VEGF；SDF-1a；NO；SOD The study of BuShenHuoXue acupuncture method on Coronary Heart Disease angina and repair endothelial b