雄黄纳米化后诱导人肺癌细胞株凋亡和抗血管生成的体外研究.pdfVIP

提 要 目的 ：研 究攻 毒 复方 “六神 丸 ”中主 要 药物 “雄 黄 ”的纳米 颗 粒 协 同顺 铂 诱 导人 肺 腺癌 A 549 细 胞 凋 亡和 抗 血 管 生成 的作 用机 制 ，并探 讨 攻毒 治法 治疗肺 癌 的研 究现 状 。方 法 ：对人肺 腺癌 A 549 细 胞株 进 行 体 外培养 ，将 攻 毒 复方 “六 神 丸 ”中 的主要 药物 “雄黄 ”纳米化 ， 以不 同浓度 的纳米雄黄 2（5ug/m l，50ug/m l, 100ug/m l) 与顺 铂 (2ug/m l)单 用或联 用 ，显微 镜 下观 察 A549 细胞 生长状态及 形态 学 改变 ；Annex in V/P I 双染色法检测细胞凋亡 ；MTT 法检测细胞增殖情况 ；免疫组化法检测 Bcl-2 、 Ca spa se- 3 的表 达 ；RT-PCR 法检 测 Surv iv in 、c-M yc 的 mRNA 转 录 水 平 ；免疫 组 化 法 检 测 integr in P 1 禾口 E-cd ; 免 疫 细 胞 化 学 染 色 法 测 定 P -caten in ；流 式 细 胞 仪 检 测 b-FGF 、MM P-9 的表 达 。并 查 阅文 献 ，总 结挖 掘 攻 毒 治法 治疗 肺 癌 的历 史 沿 革 、理 论 以及 临床研 究成果 。结果 ：不 同浓度纳米雄黄可破 坏人肺 癌 A549 细胞 的正常形态 ， 诱 导其 凋亡 ；对 A 549 细 胞 有 明显抑 制 作 用 ，与顺 铀 有 协 同作用 ，并 可 能呈 时 间和 浓 度 依赖 性 ；可抑 制 Bc l-2 蛋 白的表 达 ，对 Caspa se-3 有 活 化 作 用 ，抑 制 Surv iv in 的 表 达 ；对 integr in P l、E-cd 、 0 -ca ten in 、c-m yc 的表 达有 抑 制 作 用 ； 同时可 以抑 制 b-FGF 、匪P-9 的表达 ，高浓度优 于低 浓度 ，与 DDP 联用效果最佳 。结论 ：体外细 胞 培 养 实验 证 实纳 米 雄 黄 可 能通 过 抑 制 A 549 细 胞 增 殖 、诱 导其 凋 亡 ，通 过 多靶 点作 用 发挥 抗肿 瘤 转移 、抗血管 生成 等疗 效 ，为基 于攻毒 治法 治疗肺 癌提 供 了基础 理论及 实验 室依据 ；大量 的理论 以及 临床 实践证 明攻 毒 治法 治疗肺癌 疗 效确切 ，具有较好 的 应 用 前 景 。 关键 词 纳 米雄 黄 ；细 胞 培 养 ；A 549 细 胞 ；细 胞 凋亡 ；抗 血 管 生成 R ealgar N an ocry sta llin e in d u ced ap op tosis in h um an lun g can cer cell lin es an d its an ti-an giogen ic in v itro Sp eciality ； C lin ical R esearch of Integrated T C M and W estern M edicine A u th or ： L iu Z hai-dong T u tor ： P rofessor Q i Y uan-fu A B S T R A C T O bjectiv e : T o study th e tox ic com pound attack L iu shenw an in the m ain drugs realgar in nanoparticles and cisp latin-indu ced ap opto sis in cu ltured A 549 cells and anti-angiogen ic m echan ism ,then attack drug therap ies and treatm ent of lung can cer R e se a rch . M eth od s: H um an lung adenocarcinom a A 549 cells w ere cu ltured in v itro, th e tox i