境工程微生物学第七章微生物遗传.pptVIP

形成转导颗粒的噬菌体可以是温和的也可以是烈性的，但必须 具有能偶尔识别宿主DNA的包装机制并在宿主基因组完全降解 以前进行包装。 普遍性转导的基本要求： * 普遍性转导的三种后果： 进入受体的外源DNA通过与细胞染色体 的重组交换而形成稳定的转导子 流产转导（abortive transduction） 转导DNA不能进行重组和复制，但其 携带的基因可经过转录而得到表达。 特点：在选择培养基平板上形成微小菌落 外源DNA被降解，转导失败。 DNA不能复制，因此群体中仅一个细胞含有DNA， 而其它细胞只能得到其基因产物，形成微小菌落。 * 2、局限性转导（specialized transduction） 温和噬菌体感染 整合到细菌染色体的特定位点上 宿主细胞发生溶源化 溶源菌因诱导而发生裂解时， 在前噬菌体二侧的少数宿主 基因因偶尔发生的不正常切 割而连在噬菌体DNA上 部分缺陷的温和噬菌体 把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中 * 2、局限性转导（specialized transduction） 温和噬菌体λ裂解时的 不正常切割：包含gal或bio基因 缺陷噬菌体在宿主细胞内能够象正常的λDNA分子一样进行复制、 包装，提供所需要的裂解功能，形成转导颗粒。 * 局限性转导与普遍性转导的主要区别： a）被转导的基因共价地与噬菌体DNA连接，与噬菌体DNA一起 进行复制、包装以及被导入受体细胞中。而普遍性转导包装的 全部是宿主菌的基因。 b）局限性转导颗粒携带特定的染色体片段并将固定的个别基因 导入受体，故称为局限性转导。而普遍性转导携带的宿主基 因具有随机性。 2、局限性转导（specialized transduction） C）局限性转导的媒介是温和噬菌体，而普遍性转导的媒介可以是 温和噬菌体，也可以是烈性噬菌体。 * 三、细菌的遗传转化（genetic transformation） 定义：同源或异源的游离DNA分子(质粒和染色体DNA)被自然 或人工感受态细胞摄取，并得到表达的水平方向的基因转移过程 自然遗传转化（natural genetic transformation） 人工转化（artificial transformation） 感受态细胞：具有摄取外源DNA能力的细胞 （competent cell） * 自然感受态与人工感受态的不同？ 自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性， 受细菌自身的基因控制； 人工感受态则是通过人为诱导的方法，使细胞具有 摄取DNA的能力，或人为地将DNA导入细胞内。 （该过程与细菌自身的遗传控制无关！） * 1、自然遗传转化（简称自然转化） 1928年，Griffith发现肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae） 的转化现象 目前已知有二十多个种的细菌具有自然转化的能力 进行自然转化，需要二方面必要的条件： 建立了感受态的受体细胞 外源游离DNA分子 * 噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒 转染(transfection)： 现在把DNA转移至动物细胞的过程也称转染 提纯的噬菌体DNA以转化的（而非感染）途径进入细胞 并表达后产生完整的病毒颗粒。 特点： * 2、人工转化 用CaCl2处理细胞，电穿孔等是常用的人工转化手段。 在自然转化的基础上发展和建立的一项细菌基因重组手段， 是基因工程的奠基石和基础技术。 不是由细菌自身的基因所控制； 用多种不同的技术处理受体细胞，使其人为地处于一 种可以摄取外源DNA的“人工感受态”。 质粒的转化效率高； * 接合 (conjugation)： 细胞与细胞的直接接触（由F因子介导） 转导(transduction)： 由噬菌体介导 自然遗传转化(natural genetic transformation)： 游离DNA分子 + 感受态细胞 * “接合” “转导” 及“自然转化”这三种在自然界中 存在的细菌遗传重组过程各自的特点： a）外源DNA的来源及进入途径有差异； b）决定因素也各有不同； * 2）抗药性突变型（resistant mutant） 基因突变使菌株对某种或某几种药物，特别是抗生素，产生抗性。 特点： 正选择标记 （突变株可直接从抗性平板上获得-----在加有相应抗生素的 平板上，只有抗性突变能生长。所以很容易分离得到。） 表示方法： 所抗药物的前三个小写斜体英文字母加上“r”表示 strr 和 strs 分别表示对链霉素的抗性和敏感性 第四节 基因突变及修复 二、常见的微生物突变类型 *