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解角蛋白微生物的选育及角蛋白酶酶学性质的分析
南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 中文摘要
摘 要
本研究从腐烂的羊毛中筛选出一株具有降解角蛋白能力的L4菌株，经检测
初步印象为芽孢杆菌。
通过正交实验对L4菌株的培养条件进行了优化，结果在含3％可溶性淀粉，
小时，产生的胞外角蛋白酶活力最高，其肽酶活力可达4．5U／ml，角蛋白酶活力
为269．1U／ml。
G．75凝胶过滤，
L4菌株所产生的胞外角蛋白酶经过硫铵盐析，Sephadex
DEAE．cellulose 4B凝胶过滤等色谱层析得到纯化，经
52离子交换，Sepharose
SDS．PAGE检测呈现单一条带。角蛋白酶分子量为149KD，由四个分子量约为
37．5KD的亚基组成，用等电聚焦电泳测得其等电点为7．76，以纸层析法初步确
认该酶为高甘露糖型糖蛋白。
该角蛋白酶在以酪蛋白为底物时，最适作用温度为50℃，最适pH为7．0，
含zn2+的金属蛋白酶。
La菌株产生的角蛋白酶可以酶解羽毛粉，剥离羊毛表面的角质化鳞片，在羊
毛经微生物酶法制取仿羊绒的工艺中，具有潜在的应用价值。
关键词：芽孢杆菌，角蛋白酶，角蛋白降解
南开人学硕士研究生毕业(学位)论文 Abstract
Abstract
Inthis Bacillus
with was
paper,a L4 abilityisolatedfrom
keratin·degrading putrid
the best were
w001．Through test，the conditions
orthogonal cultivating optimized．
When inculture
cultivated 3％starch，2％feather
containing powder,O．5％Na2HP04，
7．5at for
120rpm
about48 fermented of borethe
hours，the L4
supematant highest
proteinase
ability
the
4．5U／mLand keratinase269．1U／mL．
highest ability
ThekeratinasesecretedWasextractedand
byL4 method，
purifiedbysalting—out
G一75 5
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