大眼长蝽卵黄原蛋白基因克隆、序列分析及表达研究 - 中国农业科学院.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2015, 31 10 :149-156 大眼长蝽卵黄原蛋白基因克隆、序列分析及表达研究 梁慧芳  曾凡荣  毛建军 （中国农业科学院植物保护研究所，北京 100193） 摘 要 ： 旨在为研究大眼长蝽（ ）卵黄原蛋白（Vitellogenin，Vg）分子特性及其基因生理功能。利用 Geocoris pallidipennis RT-PCR、RACE 及ELISA 方法对大眼长蝽Vg 基因进行克隆、序列分析和表达研究。该基因cDNA 全长5 667 bp（GenBank 登录号： KP688587），编码1 848 个氨基酸残基，N-末端的前19 个氨基酸为信号肽。氨基酸序列中有两个保守的多聚丝氨酸区域和RXXR 酶切位点，接近C-末端有GLAG 基序，其后有5 个保守的半胱氨酸残基，DGYR 基序位于GLAG 上游18 个氨基酸残基处。该基因 编码氨基酸序列与其它半翅目昆虫Vg 氨基酸序列相似度较高，氨基酸序列分析显示它有Vg 的典型特征，表明克隆的cDNA 序列 是大眼长蝽的Vg 基因序列。ELISA 检测发现随着发育时间的延长，卵黄原蛋白表达量逐渐增加，羽化后22 d 达到高峰，随后开 始下降，结果表明大眼长蝽雌虫卵黄原蛋白的表达量与大眼长蝽产卵量紧密相关。 关键词 ： 大眼长蝽；卵黄原蛋白；Vg 基因 ；序列分析 ；Vg 表达 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2015.10.024 ， Gene Cloning Sequence Analysis and Expression Studies of Vitellogenin Gene in Geocoris pallidipennis Liang Huifang Zeng Fanrong Mao Jianjun （Institute of Plant Protection ，Chinese Academy of Agricultural Sciences ，Beijing 100193 ） Abstract:  It was to study Vitellogenin（Vg）and the function of Vg gene in G. pallidipennis. In this study, the gene cloning, sequence analysis and expression studies of Vg gene of G. pallidipennis were carried out by RT-PCR, RACE and ELISA. The full-length cDNA of the Vg gene was 5 667 bp（GenBank accession number ：KP688587）, encoding 1848 amino acids residues, and there was a signal peptide of 19 amino acids in N-terminal. There were 2 conserved polyserine regions and 1 RXXR cleavage site in amino acid sequences. Close to the C-terminus there was a GLAG motif followed by 5 conserved cysteine residues