日本血吸虫成虫吡喹酮用药前后差异表达序列的筛选 - 中国媒介生物学 .pdf

·44 · 中国媒介生物学及控制杂志2011 年2 月第22 卷第1期 Chin J Vector Biol Control, February 2011, Vol.22, No.1 ·论 著· 日本血吸虫成虫吡喹酮用药前后差异 表达序列的筛选 周水茂，江元山，陈智，熊燕，田俊华，周敦金，徐明星，孙东光 （武汉市疾病预防控制中心微生物检验科，湖北武汉430015 ） 摘要：目的 应用抑制性消减杂交（SSH）技术构建吡喹酮治疗日本血吸虫感染新西兰大白兔前后肝脏内差减cDNA 文库，为筛选吡喹酮治疗过程中日本血吸虫体内药物反应分子靶标奠定基础。方法 日本血吸虫感染新西兰大白兔，吡 喹酮治疗者为实验组，未经吡喹酮治疗者为对照组，应用PCR⁃Select cDNA Subtraction 试剂盒进行SSH 分析，分别构建正 向和反向消减cDNA 文库，对文库进行筛选，挑取阳性克隆测序获得差异表达EST 或新EST ，并进行生物信息学分析。 结果 从2 个消减文库中共筛选到39 个有效阳性克隆，其中正向文库22 个，反向文库17个，分析表明这些EST 编码主要 是一些酶及与蛋白质合成和降解相关的蛋白质。结论 成功构建日本血吸虫成虫吡喹酮治疗前后消减文库，为进一步 研究吡喹酮治疗血吸虫病的分子机制奠定了基础。 关键词：日本血吸虫成虫；吡喹酮；抑制性消减杂交；差异表达序列 + 中图分类号：R383.2 4 文献标志码 ：A 文章编号：1003-4692（2011 ）01-0044-06 Screening of differential expression of expressed sequence tags （ESTs ）in adult Schistosoma japonicum treated with praziquantel ZHOU Shui⁃mao, JIANG Yuan⁃shan, CHEN Zhi, XIONG Yan, TIAN Jun⁃hua, ZHOU Dun⁃jin, XU Ming⁃xing, SUN Dong⁃guang Wuhan Center for Disease Control and Prevention, Wuhan 430015, Hubei Province, China Corresponding author: JIANG Yuan⁃shan, Email: jiangshanis@ Abstract: Objective To establish subtracted cDNA libraries using the suppression subtractive hybridization (SSH) technique based on the livers of New Zealand white rabbits infected with Schistosoma japonicum before and after praziquantel treatment, providing the basis for screening the drug⁃response molecular target during the therapy. Methods New Zealand white rabbits infected with S. japonicum were assigned to two groups to receive praziquantel medication or blank, respectively. The SSH technique was c