- 1、本文档共6页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
蜘蛛hmw-gdna 的电洗脱纯化提取
动 物 学 研 究 2009,Dec. 30(6):627-632 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853
Zoological Research DOI :10.3724/SP.J.1141.2009.06627
蜘蛛 HMW-gDNA 的电洗脱纯化提取
# # *
陈格飞 ,张云龙 ,林森珠,李 文,孟 清
(东华大学生物科学与技术研究所,上海 201620 )
摘要: 该文研究了蜘蛛大分子量基因组DNA (HMW-gDNA )的提取以及一种高效电洗脱纯化装置的构建。
以蜘蛛胸部肌肉组织为原料,通过自改良CTAB法提取蜘蛛HMW-gDNA ,利用透析膜和 2 mL离心管构建一种新
的HMW-gDNA快速凝胶回收装置,并对蜘蛛HMW-gDNA进行电洗脱分离回收。结果显示,改良CTAB法可高效
提取蜘蛛HMW-gDNA (48.5 kb ),且通过透析膜的截留作用,对普通琼脂糖凝胶中目的HMW-gDNA进行快速电
洗脱分离,其回收率超过 75%,OD260/OD280处于 1.8~2.0 之间,对HMW-gDNA完整性无影响。综合结果表明, 改
良CTAB法可用于蜘蛛HMW-gDNA 的提取,此电洗脱纯化装置可从普通琼脂糖中高效回收HMW-gDNA ,是一种
低成本、简捷、高效且实用性强的凝胶回收方法。
关键词: 高分子量基因组 DNA ;蜘蛛;快速分离;电洗脱
中图分类号:Q781; Q523 ;Q959.226 文献标志码:A 文章编号:0254-5853-(2009)06-0627-06
Extraction and Electroelution of Spiders ’HMW-gDNA
# # *
CHEN Ge-fei , ZHANG Yun-long , LIN Sen-zhu, LI Wen, MENG Qing
(Institute of Biological Sciences and Biotechnology, Donghua University, Shanghai 201620, China)
Abstract: Extraction of high molecular weight genomic DNA (HMW-gDNA) from spider organs and construction
of an electroelution system for obtaining HMW-gDNA efficiently are described. We improved the CTAB method to
isolate genomic DNA from spider pectoral muscle tissues, constructed a novel electroelution system with the use of 2-mL
centrifuge tube and dialysis membrane, and utilized this self-constructed electroelution system to recover target
HMW-gDNA from agarose gels.
文档评论(0)