蜘蛛hmw-gdna 的电洗脱纯化提取.pdf

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蜘蛛hmw-gdna 的电洗脱纯化提取

动 物 学 研 究 2009,Dec. 30(6):627-632 CN 53-1040/Q ISSN 0254-5853 Zoological Research DOI :10.3724/SP.J.1141.2009.06627 蜘蛛 HMW-gDNA 的电洗脱纯化提取 # # * 陈格飞 ,张云龙 ,林森珠,李 文,孟 清 (东华大学生物科学与技术研究所,上海 201620 ) 摘要: 该文研究了蜘蛛大分子量基因组DNA (HMW-gDNA )的提取以及一种高效电洗脱纯化装置的构建。 以蜘蛛胸部肌肉组织为原料,通过自改良CTAB法提取蜘蛛HMW-gDNA ,利用透析膜和 2 mL离心管构建一种新 的HMW-gDNA快速凝胶回收装置,并对蜘蛛HMW-gDNA进行电洗脱分离回收。结果显示,改良CTAB法可高效 提取蜘蛛HMW-gDNA (48.5 kb ),且通过透析膜的截留作用,对普通琼脂糖凝胶中目的HMW-gDNA进行快速电 洗脱分离,其回收率超过 75%,OD260/OD280处于 1.8~2.0 之间,对HMW-gDNA完整性无影响。综合结果表明, 改 良CTAB法可用于蜘蛛HMW-gDNA 的提取,此电洗脱纯化装置可从普通琼脂糖中高效回收HMW-gDNA ,是一种 低成本、简捷、高效且实用性强的凝胶回收方法。 关键词: 高分子量基因组 DNA ;蜘蛛;快速分离;电洗脱 中图分类号:Q781; Q523 ;Q959.226 文献标志码:A 文章编号:0254-5853-(2009)06-0627-06 Extraction and Electroelution of Spiders ’HMW-gDNA # # * CHEN Ge-fei , ZHANG Yun-long , LIN Sen-zhu, LI Wen, MENG Qing (Institute of Biological Sciences and Biotechnology, Donghua University, Shanghai 201620, China) Abstract: Extraction of high molecular weight genomic DNA (HMW-gDNA) from spider organs and construction of an electroelution system for obtaining HMW-gDNA efficiently are described. We improved the CTAB method to isolate genomic DNA from spider pectoral muscle tissues, constructed a novel electroelution system with the use of 2-mL centrifuge tube and dialysis membrane, and utilized this self-constructed electroelution system to recover target HMW-gDNA from agarose gels.

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