盐酸小檗碱提取实验的改进 - 大学化学.pdfVIP

第 18 卷 　第 4 期 大学化学 2003 年 8 月 化学实验 盐酸小檗碱提取实验的改进 张福维 　关崇新 　高坤 (鞍山师范学院化学系 　鞍山 114005) 　　摘要 　用纤维素酶预处理黄柏 ,提取盐酸小檗碱 。收率比不加酶时所得产率高 28. 0 % 。对提 取盐酸小壁碱的实验条件进行了探讨 。 　　生物碱的提取是有机化学实验课天然有机化合物提取实验之一[ 1 ] 。学生在做盐酸小檗 碱提取实验过程中 ,产率往往很低 。为此 ,对生物碱提取方法做了改进 ,探讨了用纤维素酶从 黄柏中提取盐酸小檗碱的影响因素 。近年来 ,纤维素酶在各个领域得到广泛应用 ,例如 :食品 , 饮料 ,提取天然产物等[ 2～4 ] 。在黄柏细胞的诸多成分中 ,小檗碱的含量最大 ,而细胞壁是细胞 内物质的天然屏障 ,要使细胞内物质释放出来 ,就要破坏细胞壁 ,可采用的处理方式有机械打 磨 、酸碱处理和气爆 、超声波等 。用纤维素酶破坏细胞的天然屏障 ,也可使细胞内物质释放出 来 ,达到提取有效成分的目的 ,而且实验条件较温和 。 1 　实验原理 　　根据小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大 ,而其盐酸盐在水中溶解度较小的性质 ,在酶预 处理之后 ,先用硫酸调p H ,然后用盐酸处理 ,使硫酸盐转变成盐酸盐 ,再加入 N aCl 使盐酸小檗 碱从水中析出。每组实验取黄柏两份 ,一份加酶处理 ,一份不加酶 ,在其他条件相同的情况下 , 进行对照实验 , 比较加酶提取与不加酶提取黄柏中生物碱的收率 。 2 　实验仪器与原料 、试剂 　　实验中使用的仪器有 : 电动植物粉碎机 ,隔水式电热恒温箱 , 电子恒温水浴锅 ,机械加码分 析天平 ,紫外可见光谱仪 。 　　实验中使用的原料和试剂有 :黄柏 ,纤维素酶 ,盐酸小檗碱参照品 , 乙醇 ,硫酸 ,盐酸 ,N a Cl ,生石灰 , 甲醇 。 3 　实验步骤 3 . 1 　滤纸酶的测定 　　滤纸酶的测定[5 ] 是取酶液 0 . 5mL ,加入到盛有 p H4 . 5 柠檬酸缓冲液的试管中 ,再向其中 加入 50mg 滤纸条 ,在 50 ℃下作用 1h ,用 DN S 法测定还原糖生成量 。经测定纤维素酶的滤纸 酶活为 12400 个活力单位 。 47 3 . 2 　影响盐酸小檗碱提取率的因素 3 . 2 . 1 　浸提时间对提取率的影响 　　改变浸提时间 ,不改变其他实验条件 ,盐酸小檗碱收率是不同的 ,实验中每组两份 ,一份加 酶 ,另一份不加酶 ,测定盐酸小檗碱的收率 ,实验结果见表 1 。 表 1 　提取时间对盐酸小檗碱收率的影响 产率/ % 产率/ % ( ) ( ) 浸提时间 h 浸提时间 h 加酶 不加酶 加酶 不加酶 10 0 . 92 1 0 . 52 18 1. 230 1. 0 1 12 1. 042 0 . 65 20 1. 235 1. 09 14 1. 14 1 0 . 78 22 1. 237 1. 12