新型游离三碘甲腺原氨酸人工抗原的合成与表征 - 应用化学.pdfVIP

第３０卷 第１１期 应 用 化 学 Ｖｏｌ．３０Ｉｓｓ．１１ ２０１３年１１月 　　　　　　　ＣＨＩＮＥＳＥＪＯＵＲＮＡＬＯＦＡＰＰＬＩＥＤＣＨＥＭＩＳＴＲＹ　　　　　　　 Ｎｏｖ．２０１３ 新型游离三碘甲腺原氨酸人工抗原的合成与表征  印晓梅　于海涛 　王小龙 （南京中医药大学药学院　南京２１００４６） 摘　要　利用快速、温和的“ＣｌｉｃｋＣｈｅｍｉｓｔｒｙ（点击化学）”反应，在游离三碘甲腺原氨酸（ＦＴ）的羧基上引入一 ３ 个带有三唑环的羧基“间接臂”，生成半抗原（ＦＴＣ）。再用Ｎ羟基琥珀酰亚胺活性酯法，将半抗原（ＦＴＣ）分 ３ ３ 别与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和钥孔戚血蓝素（ＫＬＨ）偶联，合成了免疫抗原（ＦＴＣＢＳＡ）和包被抗原（ＦＴＣ ３ ３ ＫＬＨ）。免疫抗原（ＦＴＣＢＳＡ）的紫外吸收光谱相对于ＦＴＣ和ＢＳＡ有明显差异，表明成功实现了偶联，经计算 ３ ３ 得到偶联比为７∶１；用ＦＴＣＢＳＡ免疫Ｂａｌｂ／ｃ小鼠，获得高效价的抗ＦＴ血清。采用间接ＥＬＩＳＡ法检测抗体的 ３ ３ ４ ＩＣ值为０３７ｍｇ／Ｌ，抗血清效价可达６２４×１０，是制备ＦＴ人工抗原的一种新方法。 ５０ ３ 关键词　游离三碘甲腺原氨酸，点击化学，半抗原，人工抗原 中图分类号：Ｏ６２９．８　　　　　文献标识码：Ａ　　　　　文章编号：１００００５１８（２０１３）１１１２８１０４ ＤＯＩ：１０．３７２４／ＳＰ．Ｊ．１０９５．２０１３．２０５７０ 三碘甲腺原氨酸（Ｔ）是人体中随血液循环的一种甲状腺激素。在血液中，绝大部分与载体蛋白结 ３ 合，只有少量是游离态的，而只有游离三碘甲腺原氨酸（ＦＴ）才具有生物学活性。ＦＴ不受结合蛋白生理 ３ ３ ［１］ 性增加和病理性减少的影响 （血液中与蛋白结合的Ｔ的量受其影响）。因此，血清中ＦＴ的检测对急 ３ ３ ［２］ ［３］ ［４］ 性心肌梗塞 、糖尿病 和肾病 等的临床诊断有一定意义。 ［５］ “ＣｌｉｃｋＣｈｅｍｉｓｔｒｙ（点击化学）”是２００２年Ｓｈａｒｐｌｅｓｓ提出的有机合成新技术 ，具有合成操作简单、 ［６］ 条件温和、产物稳定、收率高和选择性好等优点 。目前，在常规的ＦＴ人工抗原合成中，为避免连接臂 ３ 中含较强的决定簇（如芳环、共轭双键或杂环等），减少抗体对连接臂的过度识别而降低对目标分子的