大子l吸附树脂纯化石蒜中石蒜碱.pdf

第26卷第3期 应用化学 V01．26No．3 CHINESE OFAPPLIEDCHEMISTRY Mar．2009 2009年3月 JOURNAL 大子L吸附树脂纯化石蒜中石蒜碱 李 霞8 熊远福¨ 文祝友6蒋利华。 祝红福4 (湖南农业大学。理学院：6动物科技学院长沙410128) 摘要比较了9种大孔吸附树脂对石蒜碱的吸附率和解吸率，确定了HPD300为优选吸附树脂，研究了该 BV1．22 BV水以2BV／h洗 树脂纯化石蒜碱的条件及参数。室温下，9 s／t的石蒜碱上样液以2BV／h过柱，4 BV 涤后用8 70％乙醇以2BV／h洗脱，石蒜碱的纯度由9．93％提高至23．07％。 关键词石蒜，石蒜碱，大孔吸附树脂．纯化 中图分类号：0629．3 文献标识码：A 文章编号：1000-0518(2009)03-0325-04 石蒜碱(Lycorien)是从石蒜中提取的一种异喹啉类生物碱，具有很强的抗病毒活性和抗肿瘤作 用[1“]，在临床上多用于d,JL麻痹后遗症的治疗[5]。石蒜碱的传统提取纯化一般采用低碳醇类溶剂抽 提，经减压浓缩后得含石蒜碱的石蒜浸膏，然后用酸、碱处理及溶剂萃取并结合重结晶的方法[6]。高纯 石蒜碱则采用氧化铝[6]、阳离子交换树脂等柱色层法分离制备【7．8]。这些方法因使用大量有机溶剂，存 在收率低，生产成本高，易造成环境污染等缺点。大孔吸附树脂为有机高聚物吸附剂，它具有选择性高、 解吸条件温和、使用周期长、再生简便等诸多优点，已广泛用于生化物质的纯化。因石蒜碱在水中的溶 解性差，尚未见用大孔树脂分离石蒜碱的研究，本文寻找了一种适合纯化石蒜碱的大孔吸附树脂，研究 了其吸附和解吸的最佳工艺参数，建立了石蒜碱的纯化工艺。 1实验部分 1．1试剂和仪器 分析纯。 2690型高效液相色谱仪(美国Waters公司)，外标峰面积法分析样品中石蒜碱的含量，色谱条件 mmx250 mm，5 为：phenomenex．C18(2．1 20：80流动相，流速1．0mL／min；检测波长292nln，进样量20 岛津)测定样品中石蒜碱292am处的吸光度，计算其含量。 1．2石蒜碱的提取 准确称取一定质量的干石蒜粉，按料液质量比l：6加入体积分数为75％乙醇水溶液，65℃加热提 取3次。每次4 h。离心后收集上清液。回收溶剂浓缩提取液，用氨水调节溶液pH=11。再用氯仿萃取至 无生物碱反应，合并氯仿液并回收溶剂，得石蒜碱粗提物。以水为溶剂，配制不同浓度的石蒜碱粗提物 上样液，备用。 1．3石蒜碱的大孔树脂吸附分离 将大孔吸附树脂用体积分数为95％乙醇浸泡24h后湿法装柱，用体积分数为95％乙醇流动清洗 至流出的乙醇液与水按1：5混合不呈白色混浊，再以大量蒸馏水冲洗至水洗液无醇味为止。采用室温 振荡24h测大孑L树脂的饱和吸附量和解吸量。将不同浓度的石蒜碱粗提物水溶液以不同流速过柱，吸 附饱和后用蒸馏水洗至流出液在292nm处无吸收，再用解吸剂溶液洗脱，分段收集洗脱液并用紫外分 光光度法测定石蒜碱含量，考察石蒜碱粗提物上样液的浓度、流速、水洗及解吸剂用量等参数。 2008-02．12收稿．2008-05-27修回 湖南农业大学人才基金资助项目(04WDl2) 通讯联系人：熊远福，男，教授，博士生导师；E-mail：yuanfuxiong@sina．eom；研究方向：天然产物 万方数据 应用化学 第26卷 2结果与讨论 2．1大孔吸附树脂的筛选 比较9种不同极性的大孔吸附树脂对石蒜碱的吸附和解吸性能，结果见表1。 表1 9种大孔吸附树脂的性能参数及静态吸附与解吸数据 Table1 andstatic