实验性呼吸衰竭的发生与治疗机能综合实验ii.ppt

实验性呼吸衰竭的发生与治疗 机能综合实验II 【实验目的】 1.复制油酸性急性肺水肿动物模型，并探讨急 性呼吸衰竭的发病机制。 2.观察吸氧对急性呼吸衰竭的治疗作用。 【实验原理】 定义：呼吸功能不全指外呼吸功能障碍，使PaO2 下降，伴有或不伴有PaCO2 升高的病理过程。呼衰是其严重阶段。 2. 临床分类：I 型， PaO2降低，不伴有PaCO2升高。 II 型，PaO2降低，伴有PaCO2升高。 3. 急性呼吸窘迫综合征（ARDS）：急性肺损伤(ALI) 引起的急性呼吸衰竭，以进行性呼吸困难和顽固性 低氧血症为特征。 油酸致肺损伤-呼吸窘迫综合征机制 致病因子：油酸 直接或间接作用于肺泡-呼吸膜 大量中性粒细胞和巨噬细胞在趋化因子作用下聚集于肺 释放自由基、蛋白酶和炎性介质 肺泡-毛细血管膜损伤 肺泡-Cap膜 通透性 渗透性肺水肿 弥散障碍 肺泡II型细胞 受损 表面活性物质 减少 肺不张 炎性介质 支气管痉挛 肺内功能性 分流 炎性介质和 DIC 肺血管收缩 死腔样通气 低氧血症（PaO2） 急性呼衰，呼吸变浅、变快 【实验对象】 【实验器械和药品】 家兔 计算机、显微镜、动物手术器械一套、兔台、气管插管、 注射器、氧气袋、张力换能器、血细胞计数器、量筒等。 25% 氨基甲酸乙酯、油酸、生理盐水、白细胞稀释液、 考马斯亮蓝试剂、蛋白标准液等。 【实验步骤】 1.称重、麻醉(25% 氨基甲酸乙酯 4ml/kg)、固定。 2.描记正常呼吸曲线，记录正常呼吸频率和幅度。 3.取外周血测WBC计数，耳缘静脉取20ul加入0.38 WBC 稀 释液中，光镜下计数WBC。 4.家兔气管插管。 5.分组。 实验组：耳缘静脉注射油酸（0.2ml/kg), 如症状不明显， 30min 后追加0.2ml。 对照组：注射等量生理盐水。 6.观察家兔一般情况及呼吸频率与深度，描记呼吸运动曲线。 7.呼吸变深变浅时吸氧、观察效果。 8. 注射油酸30-60min后， 气管内可出现粉红色泡沫痰， 提示肺水肿形成，再次耳缘静脉采血，镜下测定外周 血WBC计数。 9. 处死家兔， 打开胸腔， 取气管-支气管-肺组织。观 察肺组织表面变化，两肺称重， 测肺体积， 计算肺 体积比及肺系数。 10. 收集支气管-肺泡灌洗液（BALF）。器官内注入 10ml 生理盐水和空气， 反复抽吸后，吸出BALF， 用BALF行WBC计数、蛋白含量测定。 （肺系数：肺重量(g)/体重（kg）） （肺体比：肺体积(ml)/体重（kg）） 【实验结果】 【注意事项】 气管插管前把气管内清洗干净。 取肺组织前用线结扎气管，防治肺组织内渗出液流失。 如肺组织内BALF抽吸困难，可变换肺标本位置。 【思考题】 1.什么是呼衰？I、II型呼衰的区别有何不同？ 2.油酸造成急性肺损伤的机制是什么？ 【实验方法附录】 1. WBC计数 白细胞数（个/mm3 )=Yx(10/4)x20=Yx50 (Y, 四个大方格中的白细胞总数） 2. 家兔耳缘静脉刀片切割取血 3. 家兔气管插管步骤 4. BALF蛋白测定：见152页表6-7 BALF的蛋白质测定（考马斯亮蓝法） 空白管 标准管 测定管 生理盐水 蛋白标准液 待测液 考马斯亮蓝液 0.1ml 0.1ml 0.1ml 5ml 5ml 5ml 谢 谢！