工业微生物学实验多媒体(十个实验).ppt

微生物学实验;实验一;一、目的要求;二、基本原理;三、实验材料;四、实验内容;培养基配方：;1．配制肉汤斜面培养基50 mL 将小烧杯置天平上，用药匙取营养肉汤干燥培养基，称取1 g先加少量自来水，溶解彻底再转移到量筒，定容至50ml，然后倒在250 mL烧杯里，加入琼脂1g（2%），浸泡于液体培养基里，液面位置做好标记，在电炉上加热融化后（注意补充蒸发的水分以保持原体积不变），用分液漏斗分装6支小试管，每支5 mL左右（约试管高度的1/5左右）， 用硅胶塞塞好试管口，再用防潮纸和棉绳将试管塞罩住扎成一捆。 图4-10 用漏斗分装培养基及摆斜面 2．配制麦芽汁斜面培养基（方法同上）;3．注意事项： 本实验使用调配好的“干燥培养基”，这种培养基是将新鲜配制的液体培养基用喷雾干燥法，真空干燥法，低温干燥法或蒸发干燥法等将培养基内所含的水分去掉；或将培养基内的各种固形成分，经适当处理，充分混匀，便成干燥粉末而成。使用时只要按比例加入一定量的水，经溶解，无需调pH，分装，高压蒸汽灭菌，即可使用。 “干燥培养基”成品很容易吸潮，在称量时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把药匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净，擦干，再取另一种药品。瓶盖也不要盖错。 在烧杯融化琼脂的过程中，人要在电炉旁看着，以免培养基因沸腾而溢出烧杯。同时，需不断搅拌，以防琼脂糊底烧焦。注意带上棉纱手套防止烫伤。 分装过程中，注意不要使培养基沾在管口上，以免沾污棉塞而引起污染。;（二）培养基灭菌 培养基分装好后，塞上棉塞，外面再包一牛皮纸，便可灭菌。灭菌的时间和温度按各培养基规定进行，以保证灭菌效果和不损坏培养基的必要成分。培养基经灭菌后，可放在37恒温箱培养24小时，无菌者方可使用。 在实验室里用得最多的加热灭菌法是高压蒸汽灭菌和干热灭菌。一般培养基和灭菌水等用高压蒸汽灭菌，而玻璃器皿常用干热灭菌。蒸汽灭菌为105-121℃，15-20分钟，干热灭菌为160-170℃，1-2小时。目的都是使细菌体内蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 ???? 在同一温度下，湿热杀菌效力比干热大，因为在湿热情况下，菌体吸收水分，使蛋白质易于凝固，同时湿热穿透力强，而且当蒸汽与被灭菌物体接触凝成水分时，又可放出热量，使温度迅速增高，从而增加灭菌效力。;（三）包扎 1．培养皿：以旧报纸密密包紧，一般以6套做一包，待灭菌。 2．吸管：在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段1.5cm长的棉花。棉花要塞得松紧恰当（过紧，吹吸液体太费劲；过松，吹气时棉花会下滑），然后分别将每支吸管尖端斜放在旧报纸条的的近左端，与报纸约呈60o角，并将右端多余的报纸打一小结。 3．三角玻扒：跟包扎吸管相似，将三角部分斜放在报纸条的近左端，与报纸约呈45o角，并将右端多余的报纸打一小结。;五、实验报告;实验二;一、目的要求;二、基本原理;三、实验材料;四、实验内容;（6）将上述在火焰上灭菌过的接种环伸入菌种管内，使接 种环在接种菌种前先在试管内壁上或空白培养基接触 一下，使接种环充分冷却，以免烫死菌种然后用接种 环在菌落上轻轻地接触，刮取少许后将接种环自菌种 管内抽出。抽出时勿与管壁相碰，也勿使再通过火焰。 （7）迅速将沾有菌种的接种环伸入斜面培管中，在斜面上， 自下而上划线，使菌种沾附在培养基上，划线时勿用 力，否则会使培养基表面划破。 （8）接种完毕后将接种环抽出，灼烧管口，塞上试管塞。塞 试管塞时勿要用试管口去迎试管塞，以免试管在移动时 侵入杂菌。 （9）接种环在放回原位前，要经火焰灼烧灭菌。同时须将试 管塞进一步塞紧以免脱落。;接种菌名及接种划线方式、接种工具： 细菌：枯草杆菌，大肠杆菌，单球菌，谷氨酸菌，假单孢杆 菌，巨大芽孢杆菌（6支） （接种方式：“之”字划线，接种工具：接种环） 霉菌：黑曲霉，黄曲霉，根霉（3支） （接种方式：点植或划直线，接种工具：接种钩或接种环） 酵母菌：面包酵母菌，古巴酵母菌，假丝酵母菌（3支） （接种方式：划直线，接种工具：接种环）;图4 – 11 各种无菌操作接种技术示意图;图2-2 穿刺接种操作过程示意图; 将接种好的斜面试管置最适合该菌种生长的恒温培养箱里。 一般细菌于37℃恒温培养箱培养1-2d 一般霉菌和酵母菌于32℃恒温培养箱培养2-3d;3. 为下次实验准备平板培养基： 各组同学先三角瓶贴