关于2第二章 微生物发酵产酶.pptVIP

二、培养基 1、碳源：提供碳元素；能源。 碳源、氮源、无机盐、生长因素、水等。 来源：淀粉及其水解物—淀粉水解糖、糖蜜、或含淀粉的原料如大米、薯类、玉米、麸皮、米糠等。 此外有些微生物可以采用脂肪、石油、乙醇等为碳源。 注意：在选择碳源时，应尽量选择对所需酶有诱导作用的碳源，而不使用或少使用有分解代谢物阻遏作用的碳源。 培养基是人工配制的供微生物生长、繁殖及合成酶的营养物质的混合物。 * 2、氮源：提供氮元素。 来源：①有机氮：常利用农副产品的籽实榨油后的副产品，如豆饼、花生饼、菜子饼等； ②无机氮：含氮的无机化合物，如（NH4）2SO4、NH4NO3 、NaNO3和（NH4）3PO4等。 3、无机盐：大量元素和微量元素。 基本功能：构成细胞的成分； 构成酶产品的组分； 作为酶的激活剂。 * 4、生长因子 指微生物生长繁殖所必不可缺的微量有机物，主要包括各种氨基酸、嘌呤或嘧啶、维生素等三类物质。 酶制剂中所用的生长因子，大多是由天然原料提供，如玉米浆、麦芽汁、豆芽汁、麸皮、米糠、酵母膏等。 5、水 * 配制培养基的注意事项： （1）培养基的碳氮比是培养基成分配比的重点； （2）碳源和氮源的选择，要注意避免碳分解代谢阻遏和氮分解代谢阻遏； （3）培养基中无机盐的选择要注意盐类引起的生理酸碱性反应； （4）发酵生产所用的培养基成分配比不可轻易改变。 * 微生物发酵产酶培养基举例 1、枯草杆菌BF7658 ａ-淀粉酶发酵培养基： 玉米粉 8% 豆饼粉 4% 磷酸氢二钠 0.8% 硫酸铵 0.4% 氯化钙 0.2% 氯化铵 0.15% 自然pH * 2、黑曲霉糖化酶发酵培养基 玉米粉 10% 豆饼 4% 麸皮 1% pH 4.4~5.0 * （二）培养基的种类 1、斜面培养基： 是供菌种生长繁殖使用的 。 2、种子培养基： 是供菌种生长繁殖使用的 。 3、发酵培养： 是供菌种生长繁殖和发酵产物合成之用。 * 三、发酵条件的控制 1、温度的调节控制 （2）有些微生物生长最适温度与发酵产酶的最适温度有所不同。 例： 酱油曲霉生产蛋白酶，28℃时蛋白酶产量比在40 ℃条件下高2~4倍，在20℃条件下发酵，则蛋白酶产量更高，但细胞生长速率较慢。 为此，在有些酶的发酵生产过程中，要在不同的发酵阶段控制不同的温度，即在微生物生长阶段控制在生长的最适温度范围，而在产酶阶段控制在产酶最适温度范围。 （1）不同的微生物有不同的最适生长温度。 * （3）温度的控制方法 一般采用热水升温，冷水降温。因此，在发酵罐中均设有足够传热面积的热交换装置，如排管、蛇管，夹套、喷淋管等。 * * 2、pH值的调节控制 （1）不同微生物，其生长繁殖的最适pH值有所不同。 （2） 微生物生长的最适pH值与产酶最适pH值往往不同。 （3）有些微生物可以同时产生若干种酶，在生产过程中，通过控制培养基的pH，往往可以改变各种酶之间的产量比例。 黑曲霉 α-淀粉酶 糖化酶 pH值中性 ↑ ↓ pH值偏酸性 ↓ ↑ * （4）影响pH值的因素 一般来说，培养基成分中C/N比高，发酵液倾向于酸性，pH低；C/N比低，发酵液倾向于碱性，pH高。 不同盐的利用对pH也会产生影响。 （5）生产中控制pH值的方法 ②添加缓冲液维持一定的pH值（如磷酸盐）； ①调节培养基的原始pH，保持一定的C/N比； ③发酵液中pH过高，加糖或淀粉来调节。反之，加尿素或液氨； pH值还与通气量有关。 ④通过调节通气量来实现； 加酸、碱。 * 3、溶解氧的调节控制 溶解氧指溶解在培养基中的氧。微生物一般只能利用溶解氧。 调节溶氧速率的方法 （1）调节通气量； （2）调节氧的分压； （3）调节气液接触时间； （4）调节气液接触面积； （5）改变培养液性质。 * * * 5、湿度的调节控制 用固体培养基生产酶制剂时，一般前期湿度低些，培养后期湿度大些，有利于产酶。 4、泡沫 形成：通气搅拌、培养基中某些成分的变化、代谢产生的气体。 危害：阻碍CO2的排除，影响氧的溶解；引起染菌。 消泡方法：