韩海棠《动物生物化学》第十一章 蛋白质的生物合成.pptVIP

第十一章 蛋白质的生物合成（翻译）Protein Biosynthesis，Translation 参与蛋白质生物合成的物质包括 20种氨基酸(AA)作为原料 酶及众多蛋白因子，如IF、eIF ATP、GTP、无机离子 一、翻译模板mRNA及遗传密码 mRNA是遗传信息的携带者 遗传密码的破译 从mRNA 5?端起始密码子AUG到3?端终止密码子之间的核苷酸序列，各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链，称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。 1. 连续性(commaless) 3. 简并性(degeneracy) 遗传密码中，除色氨酸和甲硫氨酸仅有一个密码子外，其余氨基酸有2、3、4个或多至6个三联体为其编码。 4. 通用性(universal) 蛋白质生物合成的整套密码，从原核生物到人类都通用。 已发现少数例外，如动物细胞的线粒体、植物细胞的叶绿体。 密码的通用性进一步证明各种生物进化自同一祖先。 二、核糖体是多肽链合成的装置 核糖体的组成 三、tRNA与氨基酸的活化 tRNA的三级结构示意图 摆动性(wobble) tRNA与酶结合的模型 氨基酰-tRNA合成酶对底物氨基酸和tRNA都有高度特异性。 氨基酰-tRNA合成酶具有校正活性(proofreading activity) 。 氨基酰-tRNA的表示方法： Ala-tRNAAla Ser-tRNASer Met-tRNAMet 真核生物： Met-tRNAiMet 原核生物： fMet-tRNAifMet 翻译的起始(initiation) 翻译的延长(elongation) 翻译的终止(termination ) (一）肽链合成起始 指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核糖体结合而形成翻译起始复合物 (translational initiation complex)。 原核生物翻译起始复合物形成 核糖体大小亚基分离； mRNA在小亚基定位结合； 起始氨基酰-tRNA的结合； 核糖体大亚基结合。 真核生物翻译起始复合物形成 （二）肽链合成延长 指根据mRNA密码序列的指导，次序添加氨基酸从N端向C端延伸肽链，直到合成终止的过程。 延伸过程所需蛋白因子称为延长因子(elongation factor, EF) 原核生物：EF-T (EF-Tu, EF-Ts) EF-G 真核生物：EF-1 、EF-2 2 成肽 3 转位 延长因子EF-G有转位酶( translocase )活性，可结合并水解1分子GTP，促进核糖体向mRNA的3侧移动。 多聚核糖体(polysome) （四）蛋白质的加工 几种有促进蛋白折叠功能的大分子 1.分子伴侣 (molecular chaperon) 热休克蛋白(heat shock protein, HSP) HSP70、HSP40和GreE族 伴侣素(chaperonins) GroEL和GroES家族 2. 酶类 蛋白二硫键异构酶 (protein disulfide isomerase, PDI) 肽-脯氨酰顺反异构酶 (peptide prolyl cis-trans isomerase, PPI) 蛋白质的修饰 1）肽链N端的修饰 2）氨基酸侧链的修饰 3）多肽链的水解修饰 4）糖基化修饰 四、蛋白质合成后的靶向输送 蛋白质合成后需要经过复杂机制，定向输送到最终发挥生物功能的细胞靶部位，这一过程称为蛋白质的靶向输送。 所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号，主要为N末端特异氨基酸序列，可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位，这一序列称为信号序列 。 信号肽的一级结构 嘌呤霉素作用示意图 乳糖操纵子学说（Lac Operon Theory） 一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因组成 一个操纵子。调节基因编码调节蛋白，调节蛋白与操纵基因结 合，从而调控结构基因的表达。 乳糖为诱导物。当有乳糖存在时，乳糖与有活性的调节蛋 白（阻遏物）结合时，阻遏物失活，则不能与操纵基因结合， 解除对β-半乳糖苷酶基因（结构基因）的抑制，开始表达。 如果去掉乳糖时，阻遏物又恢复其活力，与操纵基因DNA 结合，将β-半乳糖苷酶基因关闭。但这种关闭或开启并不是 100%。 1 蛋白质折叠 新生肽链的折叠在肽链合成中、合成后完成，新生肽链N端在核糖体上一出现，肽链的折叠即开始。可能随着序列的不断延伸肽链逐步折叠，产生正确的二级结构、结构域到形成完整空间构象。 一般认为，多肽链自身氨基酸顺序储存着蛋白质折叠的信息，即一级结构是空间构象的基础。 细胞